兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長狀況,同時進行細胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態學觀察分析,并應用免疫熒光染色平滑肌特有的α-肌動蛋白進行細胞學鑒定分析。最后根據細胞計數繪制細胞生長曲線和增殖曲線。 實驗材料 雄性新西蘭白兔 試劑、試劑盒 DMEM Ⅱ型膠原酶 ......閱讀全文
兔膀胱平滑肌細胞培養
實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長狀況,同時進行細胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態學觀察分析,并應用免疫熒光染色平滑肌特有的α-肌動蛋白進行細胞學鑒
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離
細胞技術專題:兔膀胱平滑肌細胞培養實驗(一)
兔膀胱平滑肌細胞培養可以:(1)分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞;(2)進行細胞學鑒定研究;(3)用于細胞學其他研究。實驗方法酶分離法 實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下
細胞技術專題:兔膀胱平滑肌細胞培養實驗(三)
?收起? 注意事項1. 應嚴格無菌操作。2. 仔細徹底剝除膀胱黏膜、黏膜下及漿膜層,是確保獲的大量高質單個膀胱平滑肌細胞的基礎。3. 膀胱平滑肌組織應盡量減碎以確保充分消化。4. 嚴格控制膠原酶和胰蛋白酶的濃度和消化時間,見消化液混濁、組織塊呈絮狀,或在倒置顯微鏡下見消化液中有較多單個細胞或細胞小
細胞技術專題:兔膀胱平滑肌細胞培養實驗(二)
二、結果 兩只兔所有標本均獲成功。倒置顯微鏡觀察平滑肌細胞24 小時均可見膀胱平滑肌細胞貼壁生長,正常兔 7 天左右、而梗阻兔則需10~12 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。均傳代順利,傳代后約正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。本組中均傳至第8 代,經第8
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗——酶分離法
兔膀胱平滑肌細胞培養可以:(1)分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞;(2)進行細胞學鑒定研究;(3)用于細胞學其他研究。實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長
正常大兔主動脈平滑肌細胞培養
實驗材料:1.?正常大兔主動脈2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.23.?消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%膠原酶Ⅰ4.?細胞培養瓶(T25)5.?手術刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷6.?網篩(100目)7.?離心管(15m
膀胱平滑肌瘤病例報告
患者女性,60歲,因“體檢發現膀胱內占位性病變1d”入院。?尿常規示:RBC84.00個/μL,WBC87.5個/μL,EC80.7個/μL,LEU+++,潛血:微量;血清HE4、CA-724、SCC、CYFRA、NSE、AFP、CA-125、CA-153、CA-199、CEA、FER無異常。泌尿系
平滑肌細胞培養方法
貼壁法原代培養1.1 細胞培養1.1.1 培養液配制 DMEM(美國Gibco公司),Hepes(15mmol/L),青霉素(100u/ml),鏈霉素(100mg/ml),優質胎牛血清(原代培養濃度20%,傳代培養濃度10%,美國Hyclone)。1.1.2 培養器皿 25cm2塑料培養瓶(Cost
平滑肌細胞培養方法4
?動脈平滑肌細胞培養的幾個問題組織塊大小邊緣密度翻面時間觀察時間對原代細胞萌發的影響對于貼塊法的原代培養來源,由于細胞并非直接獲得,而是從組織塊邊緣長出,其中有一“突破過程”,且細胞萌發后尚需一定的細胞密度才能使其存活、增殖,故組織塊大小、邊緣、密度均影響細胞萌出與否及細胞存活、增殖。公認的方法是將
平滑肌細胞培養方法2
1 材料與方法1.1 材料 9~12d新生健康清潔級KM小鼠,雌雄不限,購自重慶醫科大學實驗動物中心。RPMI-1640干粉培養基,D-Hanks粉,標準胎牛血清,胰蛋白酶粉(1∶250)均購自Hy-Clone公司;青霉素鈉、硫酸鏈霉素購自華北制藥廠;鼠抗兔平滑肌α肌動蛋白單克隆抗體,購自Zymed
平滑肌細胞培養方法3
2 結果2.1 體外培養的胎兒臍動脈血管平滑肌細胞的形態觀察 實驗中觀察到臍動脈組織塊貼壁后5~7d可見有細胞以垂直方向從組織塊周圍游走出來(見圖1),但并不是所有的組織塊周圍都有細胞游出,離組織塊較遠的區域也可以看到細胞,此為平滑肌細胞的漂移性生長特性(見圖2),細胞形態多樣,大小不一,多為長梭形
關于膀胱平滑肌惡性腫瘤的預后介紹
膀胱平滑肌惡性腫瘤惡性程度高,高分期或高分級的膀胱平滑肌惡性腫瘤預后不佳,多在發病3年內死亡。但有膀胱平滑肌惡性腫瘤自發消退的報道,輔助性放療或化療對預后幫助不大。
關于膀胱平滑肌惡性腫瘤的病因分析
平滑肌肉瘤是一種由平滑肌細胞或向平滑肌細胞分化的間充質細胞所組成的惡性腫瘤。其發生與Epstein-Barr病毒感染有關,另在HIV病毒感染和接受器官移植的患者中發病率較高。
膀胱巨大黏膜下平滑肌瘤超聲表現病例分析
患者女,38歲,因“尿頻、尿急、尿不盡伴小腹墜漲1年余”就診。實驗室檢查和體格檢查未見明顯異常。超聲檢查:膀胱充盈欠佳(患者不能耐受),膀胱左前壁,于膀胱輪廓內顯示大小約10.1 cm×8.8 cm×7.6 cm類橢圓形低回聲區,內部回聲稍欠均勻,可見點片狀較低回聲及條索狀、漩渦狀低回聲散在
關于膀胱平滑肌惡性腫瘤的治療介紹
1.腫瘤較小時可行膀胱部分切除,腫瘤較大或呈浸潤性生長時施行根治性全膀胱切除術。 2.膀胱平滑肌惡性腫瘤對化療不敏感,手術后即使配合化學治療或放射治療,患者生存率也無提高。
關于膀胱平滑肌惡性腫瘤的檢查介紹
一、實驗室檢查 尿常規檢查可見肉眼血尿或鏡下血尿。 二、輔助檢查 1.B超 示腫物外形不規則,內部呈不均勻偏低回聲,并有多處液性暗區。 2.CT 顯示膀胱區實質性腫物,增強掃描顯示明顯強化。 3.膀胱鏡檢查及活檢 可協助診斷。
兔食管上皮細胞培養步驟
原代細胞實驗材料:? ? ? 1. 大兔的正常食管組織? ? ? 2. 6孔培養板:用多聚賴氨酸4℃包被過夜? ? ? 3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.4? ? ? 4. 手術刀、解剖剪、解剖鑷、
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
大鼠主動脈平滑肌細胞培養
實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料 SD大鼠試劑、試劑盒 PBSFBSDMEM儀器、耗材 手術剪手術鉗眼科剪刀眼科鑷子大頭針手術刀培養皿實驗步驟 一、實驗步驟1. SD 大鼠(150
關于膀胱平滑肌惡性腫瘤的發病機制介紹
腫瘤可發生在膀胱內任何部位,但以膀胱頂部和側壁及輸尿管開口周圍常見,也有發生在膀胱憩室內的報道。腫瘤位于膀胱壁可突向腔內或壁外,肉眼所見肉瘤為黏膜下結節性或潰瘍性腫塊。瘤體大小可達10余厘米,腫瘤切面呈魚肉狀,色灰白或灰紅,質韌,常見局灶性的出血或壞死。
簡述膀胱平滑肌惡性腫瘤的臨床表現
1.肉眼血尿和排尿困難 血尿多為肉眼血尿,排尿困難呈進行性加重。隨膀胱容量的減少出現尿頻。 2.體檢 腹部觸及表面不光滑、質硬、無壓痛、界限不清、活動度差的實質性腫物。
關于膀胱平滑肌惡性腫瘤的鑒別診斷介紹
膀胱結石 血尿、排尿不暢,下腹部不適與膀胱腫瘤類似。膀胱區平片是診斷膀胱結石的主要方法,90%病例可顯示結石陰影。陰性結石可通過膀胱造影、B型超聲、CT檢查作出診斷。膀胱鏡檢查可直接觀察到結石的大小和形態。同時可顯示結石是否合并腫瘤,懷疑時可取活組織檢查明確診斷。 輸尿管囊腫 輸尿管囊腫感
簡述膀胱平滑肌惡性腫瘤的臨床表現
平滑肌肉瘤(LMS)是一種由平滑肌細胞或平滑肌分化間細胞所構成的惡性腫瘤。起源于泌尿生殖系統的肉瘤少見。 其中成年人的平滑肌肉瘤為多,而小兒以橫紋肌肉瘤最為常見,至今發生于輸尿管、膀胱、尿道的平滑肌肉瘤文獻上都有報道,其中以膀胱平滑肌惡性腫瘤報道最多,其次是發生于尿道,其來源可能是泌尿道平滑肌
大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
正常大鼠原代主動脈平滑肌細胞培養
一、實驗試劑?1、培養基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——消化法
人臍動脈平滑肌細胞培養可以:(1)獲得人臍動脈平滑肌細胞;(2)作為重大動脈疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原
細胞技術專題:人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
人臍動脈平滑肌細胞培養可以:(1)獲得人臍動脈平滑肌細胞;(2)作為重大動脈疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法消化法 貼塊法 實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。 實