大鼠主動脈平滑肌細胞培養
實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料 SD大鼠試劑、試劑盒 PBSFBSDMEM儀器、耗材 手術剪手術鉗眼科剪刀眼科鑷子大頭針手術刀培養皿實驗步驟 一、實驗步驟1. SD 大鼠(150-200 g),斷頭,浸入75%的酒精中15 min。2. 置入超凈臺中,將大鼠固定于殺鼠板上,在無菌條件下打開腹腔,分離出胸主動脈、腹主動脈, 摘出。3. PBS 清洗3 遍,剝去外膜,用手術刀片刮去內膜,留下中膜并將其移入1 mL 的培基中、剪成1×1 mm2 大小組織塊。4. 再將PBS清洗組織塊,移入25 mL 的培養瓶中,用尖嘴彎管均勻貼好組織塊,放入37℃、5% CO2的培養箱倒置培養6 小時后,待組織塊貼壁后,再加入2.5 mL 培養液后放回培養箱中。5. 隨后每3 天予以全量換液。二、結果3-5 天后可見組織塊周圍有細......閱讀全文
大鼠主動脈平滑肌細胞培養
實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料 SD大鼠試劑、試劑盒 PBSFBSDMEM儀器、耗材 手術剪手術鉗眼科剪刀眼科鑷子大頭針手術刀培養皿實驗步驟 一、實驗步驟1. SD 大鼠(150
大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
正常大鼠原代主動脈平滑肌細胞培養
一、實驗試劑?1、培養基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗_貼塊法
大鼠主動脈平滑肌細胞培養可用于:(1)獲得大鼠主動脈平滑肌細胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于動脈疾病研究。實驗方法原理運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒PBSFBSDME
正常大兔主動脈平滑肌細胞培養
實驗材料:1.?正常大兔主動脈2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.23.?消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%膠原酶Ⅰ4.?細胞培養瓶(T25)5.?手術刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷6.?網篩(100目)7.?離心管(15m
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗
大鼠血管內皮細胞培養可以:(1)用于血液流動性、防止血栓形成、調節血管張力等研究;(2)用于選擇性通透性以及免疫調節等方面研究。實驗方法貼塊法實驗方法原理貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。但缺點使易混有成纖維細胞和平滑肌細胞,前者的貼壁時間和內皮接
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗——貼塊法
大鼠血管內皮細胞培養可用于:(1)血液流動性、防止血栓形成、調節血管張力等研究;(2)選擇性通透性以及免疫調節等方面研究。實驗方法原理貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。實驗材料雄性Wistar大鼠試劑、試劑盒DMEM胎牛血清內皮細胞生長因子肝素鈉青
平滑肌細胞培養方法
貼壁法原代培養1.1 細胞培養1.1.1 培養液配制 DMEM(美國Gibco公司),Hepes(15mmol/L),青霉素(100u/ml),鏈霉素(100mg/ml),優質胎牛血清(原代培養濃度20%,傳代培養濃度10%,美國Hyclone)。1.1.2 培養器皿 25cm2塑料培養瓶(Cost
平滑肌細胞培養方法2
1 材料與方法1.1 材料 9~12d新生健康清潔級KM小鼠,雌雄不限,購自重慶醫科大學實驗動物中心。RPMI-1640干粉培養基,D-Hanks粉,標準胎牛血清,胰蛋白酶粉(1∶250)均購自Hy-Clone公司;青霉素鈉、硫酸鏈霉素購自華北制藥廠;鼠抗兔平滑肌α肌動蛋白單克隆抗體,購自Zymed
兔膀胱平滑肌細胞培養
實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長狀況,同時進行細胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態學觀察分析,并應用免疫熒光染色平滑肌特有的α-肌動蛋白進行細胞學鑒
平滑肌細胞培養方法3
2 結果2.1 體外培養的胎兒臍動脈血管平滑肌細胞的形態觀察 實驗中觀察到臍動脈組織塊貼壁后5~7d可見有細胞以垂直方向從組織塊周圍游走出來(見圖1),但并不是所有的組織塊周圍都有細胞游出,離組織塊較遠的區域也可以看到細胞,此為平滑肌細胞的漂移性生長特性(見圖2),細胞形態多樣,大小不一,多為長梭形
平滑肌細胞培養方法4
?動脈平滑肌細胞培養的幾個問題組織塊大小邊緣密度翻面時間觀察時間對原代細胞萌發的影響對于貼塊法的原代培養來源,由于細胞并非直接獲得,而是從組織塊邊緣長出,其中有一“突破過程”,且細胞萌發后尚需一定的細胞密度才能使其存活、增殖,故組織塊大小、邊緣、密度均影響細胞萌出與否及細胞存活、增殖。公認的方法是將
大鼠平滑肌抗體(SMA)ELISA檢測法
大鼠平滑肌抗體(SMA)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗大鼠?SMA?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?SMA與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠SMA,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Strept
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離
大鼠胰島細胞培養實驗
大鼠胰島細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單
大鼠胰島細胞培養實驗
實驗方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單細胞。實驗材料 一周齡Wistar 大鼠? 試劑、試劑盒 D-Hanks’液 胰蛋白酶 Ⅴ型膠原酶 葡萄糖 碘乙酸? 儀器、耗材 手術剪 手術鉗 眼科剪刀 眼科鑷子
大鼠胰島細胞培養實驗
大鼠胰島細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單
大鼠胰島細胞培養實驗
大鼠胰島細胞可用于:(1)實驗室胰島細胞功能深入研究的實驗材料;(2)糖尿病新藥的細胞篩選模型。實驗方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單細胞。?實驗材料一周齡Wistar 大鼠試劑、試劑盒D-Hanks’液
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
大鼠纖維環細胞培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mL大鼠纖維環細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約
大鼠肝星狀細胞培養實驗
細胞培養技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
大鼠肝星狀細胞培養實驗
細胞培養技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
大鼠星型膠質細胞培養實驗
酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大鼠星形膠質細胞原代培養后,作膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學染色鑒定,應用缺
RNc細胞大鼠皮質細胞培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mLRNc細胞大鼠皮質細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,
大鼠星型膠質細胞培養實驗
酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大鼠星形膠質細胞原代培養后,作膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學染色鑒定,應用缺