平滑肌細胞培養方法3
2 結果2.1 體外培養的胎兒臍動脈血管平滑肌細胞的形態觀察 實驗中觀察到臍動脈組織塊貼壁后5~7d可見有細胞以垂直方向從組織塊周圍游走出來（見圖1），但并不是所有的組織塊周圍都有細胞游出，離組織塊較遠的區域也可以看到細胞，此為平滑肌細胞的漂移性生長特性（見圖2），細胞形態多樣，大小不一，多為長梭形、菱形或星形； 9~11 d細胞進入對數生長期，細胞生長加速，部分區域可見“峰-谷”樣生長（見圖3）；約2周左右細胞融合成片，甚至相互交叉生長形成多層可以進行傳代培養。細胞用胰蛋白酶消化后呈圓形，傳代接種于培養瓶4 h就有細胞貼壁，24 h后細胞伸展，細胞形態多樣，胞漿豐富，仍然呈“峰-谷”樣生長特性，細胞生長較快，5~7 d長滿瓶底，可以進行傳代。本實驗取材于臍動脈，采用貼塊法成功培養出平滑肌細胞。臍動脈是中動脈，中膜中唯一的細胞是平滑肌細胞，內膜中唯一細胞的是內皮細胞，實驗中只去除血管外膜，保留中膜和內膜，將中膜和內膜一起培養，摒......閱讀全文
平滑肌細胞培養方法3
2 結果2.1 體外培養的胎兒臍動脈血管平滑肌細胞的形態觀察 實驗中觀察到臍動脈組織塊貼壁后5~7d可見有細胞以垂直方向從組織塊周圍游走出來（見圖1），但并不是所有的組織塊周圍都有細胞游出，離組織塊較遠的區域也可以看到細胞，此為平滑肌細胞的漂移性生長特性（見圖2），細胞形態多樣，大小不一，多為長梭形
平滑肌細胞培養方法
貼壁法原代培養1.1 細胞培養1.1.1 培養液配制 DMEM（美國Gibco公司），Hepes（15mmol/L），青霉素（100u/ml），鏈霉素（100mg/ml），優質胎牛血清（原代培養濃度20%，傳代培養濃度10%，美國Hyclone）。1.1.2 培養器皿 25cm2塑料培養瓶（Cost
平滑肌細胞培養方法2
1 材料與方法1.1 材料 9~12d新生健康清潔級KM小鼠，雌雄不限，購自重慶醫科大學實驗動物中心。RPMI-1640干粉培養基，D-Hanks粉，標準胎牛血清，胰蛋白酶粉（1∶250）均購自Hy-Clone公司；青霉素鈉、硫酸鏈霉素購自華北制藥廠；鼠抗兔平滑肌α肌動蛋白單克隆抗體，購自Zymed
平滑肌細胞培養方法4
?動脈平滑肌細胞培養的幾個問題組織塊大小邊緣密度翻面時間觀察時間對原代細胞萌發的影響對于貼塊法的原代培養來源，由于細胞并非直接獲得，而是從組織塊邊緣長出，其中有一“突破過程”，且細胞萌發后尚需一定的細胞密度才能使其存活、增殖，故組織塊大小、邊緣、密度均影響細胞萌出與否及細胞存活、增殖。公認的方法是將
兔膀胱平滑肌細胞培養
實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長狀況，同時進行細胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態學觀察分析，并應用免疫熒光染色平滑肌特有的α-肌動蛋白進行細胞學鑒
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
大鼠主動脈平滑肌細胞培養
實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養，并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料 SD大鼠試劑、試劑盒 PBSFBSDMEM儀器、耗材 手術剪手術鉗眼科剪刀眼科鑷子大頭針手術刀培養皿實驗步驟 一、實驗步驟1. SD 大鼠(150
大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養，并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
正常大兔主動脈平滑肌細胞培養
實驗材料：1.?正常大兔主動脈2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.23.?消化液：0.125%胰蛋白酶，0.1%膠原酶Ⅰ4.?細胞培養瓶（T25）5.?手術刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪，眼科鑷6.?網篩（100目）7.?離心管（15m
正常大鼠原代主動脈平滑肌細胞培養
一、實驗試劑?1、培養基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+ 1% P/S4、染色液
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——消化法
人臍動脈平滑肌細胞培養可以：（1）獲得人臍動脈平滑肌細胞；（2）作為重大動脈疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原
細胞培養技術3
◇水解乳蛋白 水解乳蛋白為淡黃色粉末，雖易潮解結塊，但不影響使用。 不同批號和牌號質量有差異。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解后的產物，含有豐富的氨基酸。開始時它是專為猴腎細胞培養設計的，而實際上它對許多細胞系(株)，如Hela細胞和原代細胞都是一種優良培養基。使用時用Hanks液配制成0
細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（一）
兔膀胱平滑肌細胞培養可以：（1）分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞；（2）進行細胞學鑒定研究；（3）用于細胞學其他研究。實驗方法酶分離法 實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下
細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（三）
?收起? 注意事項1. 應嚴格無菌操作。2. 仔細徹底剝除膀胱黏膜、黏膜下及漿膜層，是確保獲的大量高質單個膀胱平滑肌細胞的基礎。3. 膀胱平滑肌組織應盡量減碎以確保充分消化。4. 嚴格控制膠原酶和胰蛋白酶的濃度和消化時間，見消化液混濁、組織塊呈絮狀，或在倒置顯微鏡下見消化液中有較多單個細胞或細胞小
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——貼塊法
實驗方法原理運用貼塊法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液胰蛋白酶膠原酶彈性蛋白酶DMEM儀器、耗材眼科剪滴管離心機培養皿CO2培養箱實驗步驟一、實驗步驟1. ?要用胎牛血清。開始用的是小牛血清，所以總是不
細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（二）
二、結果 兩只兔所有標本均獲成功。倒置顯微鏡觀察平滑肌細胞24 小時均可見膀胱平滑肌細胞貼壁生長，正常兔 7 天左右、而梗阻兔則需10~12 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。均傳代順利，傳代后約正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。本組中均傳至第8 代，經第8
細胞技術專題：人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
人臍動脈平滑肌細胞培養可以：（1）獲得人臍動脈平滑肌細胞；（2）作為重大動脈疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法消化法 貼塊法 實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。 實
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗——酶分離法
兔膀胱平滑肌細胞培養可以：（1）分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞；（2）進行細胞學鑒定研究；（3）用于細胞學其他研究。實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長
細胞培養大攻略3
70、?血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現，該如何處理?血清中沉淀物的出現有許多種原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質量。?若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清
大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗_貼塊法
大鼠主動脈平滑肌細胞培養可用于：（1）獲得大鼠主動脈平滑肌細胞；（2）用于血管疾病研究；（3）用于動脈疾病研究。實驗方法原理運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養，并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒PBSFBSDME
3D細胞培養技術
細胞在平面上生長是人為的和不自然的，因為這與細胞能夠以佳狀態進行旺盛生長的體內環境并不相同。因此，傳統的2D單層細胞培養物很難恰當地反映出細胞的體內生長環境，進而可能造成細胞結構和組織功能的缺失。?????? 三維（3D）細胞培養技術能夠更好地模擬生物體內細胞存活的自然環境，其自然條件可保持細胞間相
3D細胞培養方式
理想的3D培養模型可以模擬組織特異性或特定于生理、病理生理疾病微在該環境中細胞可以實現增殖，分化。這種模型將包括細胞與細胞，細胞與細胞外基質的相互作用，組織特異性硬度，氧，營養和代謝廢物梯度，以及它們的組合組織特異性支架細胞。01、無支架培養方式無支架3D培養方法依賴于自聚集專門培養板中的細胞，如懸
3D細胞培養優勢
??在體外模擬復雜的組織結構和體內形態，接近體內正常細胞生長環境??展示分化等細胞活動和細胞間反應，實現真實的細胞生物學和功能??準確建立靶組織模型，有效預測病程和藥物反應??使用少量細胞數，實現快速生長，兼容自動化儀器，降低成本
3D細胞培養的定義
3D細胞培養是一種在人工創造的環境中生物細胞可以在所有三維空間中生長的技術，使細胞能夠在載體的三維立體空間結構中遷移、生長，構成三維的細胞載體復合物，3D細胞培養允許細胞在體外向各個方向生長，類似于它們在體內的生長方式。3D培養技術既能保留體內細胞微環境的物質及結構基礎，又能展現細胞培養的直觀性及條
3D細胞培養的概念
3D細胞培養是指將動物細胞與具有三維結構的支架材料共同培養，使細胞能夠在三維立體的空間生長、增殖和遷移，構成三維的細胞-細胞或細胞-載體復合物，從而更好地模擬細胞在體內的生長環境。目前主要分為有支架和無支架的三維培養技術，其中依附支架的材料主要包括膠原和水凝膠等，價格低廉、操作簡單；不依附支架的主要
細胞培養方法
一、準備工作 準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。 二、取材
細胞培養方法
一、準備工作? 準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。?二、取