傳染病新型分子現場快速檢測領域取得重要進展

　　近日，廣東省農業科學院動物衛生研究所（以下簡稱動衛所）聯合華南農業大學等單位在傳染病新型分子現場快速檢測領域取得重要進展。相關研究發表于Sensors and Actuators B: Chemical。動衛所為該論文第一署名單位，廣東省農業科學院教授廖明和華南農業大學獸醫學院副教授張建民為共同通訊作者，動衛所副研究員勾紅潮、華南農業大學在讀博士研究生林琦杰、動衛所副研究員沈海燕為共同第一作者。

　　精準分子診斷是預防和控制重大傳染病的關鍵。目前基于PCR擴增原理的分子檢測技術已在傳染病診斷中得到廣泛應用，但該技術需精密儀器和專業操作人員，很難在現場快速檢測（POCT，point-of-care testing）中得到應用。與傳統的PCR技術相比，恒溫擴增技術在POCT檢測領域展現出明顯優勢，但是反應原理復雜、靶基因兼容性低和小型化設備缺乏成為POCT分子檢測領域的國際難題。

　　該項研究中，研究人員提出了基于線性鏈置換的恒溫擴增原理和掌式設備的一站式解決方案，通過深入研究恒溫擴增的原理，發現線性引物組合可有效啟動恒溫擴增反應，證實了線性鏈置換恒溫擴增檢測方法（LDIA，linear displacement isothermal amplification）的反應原理，優化得到了該方法的反應體系。通過分析LDIA方法對不同GC含量DNA的檢測能力，測試了該方法對不同靶基因的兼容性。

　　該研究進一步探索出以鏈置換探針（SD，strand displacement probes）為基礎的探針法線性鏈置換恒溫擴增檢測技術（LDIA-SD），增強了反應特異性，最低敏感性可達100拷貝。同時，該研究開發了一體化智能檢測設備與檢測軟件，集成恒溫加熱、熒光監測為一體，實現了LDIA-SD技術的一站式應用，檢測結果可利用智能手機進行自動分析與云端傳輸，對于傳染病監測預警具有重要意義。

　　該研究突破了傳統的“恒溫擴增需特殊引物結構”認知，創建的LDIA-SD技術反應原理簡單、引物設計便捷、用戶使用環境友好，整個反應過程可在1小時完成，可現場或居家操作，在傳染病現場分子快速檢測領域具有廣闊的應用前景。

　　上述研究獲得“十四五”廣東省農業科技創新十大主攻方向“揭榜掛帥”項目、廣東省農業科學院“領軍人才”引進項目、廣東省農業科學院協同創新中心項目、廣東省農業科學院“優秀博士”人才引進和“青年研究員”人才培養項目、嶺南現代農業科學與技術廣東省實驗室茂名分中心科研啟動項目、國家肉雞產業技術體系項目、沃爾瑪基金等資助。