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  • 發布時間:2019-11-12 14:19 原文鏈接: 體細胞融合實驗

    • 單層培養細胞的融合

    • 懸浮培養細胞的融合

               

    實驗材料

    細胞

    試劑、試劑盒

    PEG-1000

    儀器、耗材

    培養基

    實驗步驟

    1. 以適當的培養基培養細胞至接近匯合成片的密度(80% 匯合率)。

    2. 吸干 60 mm 規格平皿或 T-25 培養瓶中的培養基,加 2 ml 50% PEG-1000,輕輕轉動 1 分鐘讓該粘稠液體覆蓋所有細胞。

    3. 往培養皿或瓶中加 5 ml 完全培養基以稀釋 PEG 溶液。

    4. 吸凈培養皿或瓶中的液體,再加 5 ml 培養基洗涮細胞,進一步稀釋 PEG。

    5. 再洗一次細胞,之后,加 5 ml 新培養基。

    6. 細胞放回 37℃ CO2 培養箱,過夜。

    7. 恰當地處理細胞:可以消化細胞并重新接種和/或進行生化篩選。

    8. 篩選細胞:融合 12~24 小時后就可以進行異核體分析。

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