光學和電子顯微鏡樣品制備的制片法

顯微制片法一般包括切片法、整體封片法、涂片法和壓片法4類。①切片法。光學顯微鏡的切片厚度在2～25微米之間，一般動植物材料的切片以厚10微米左右為合適。切片法根據包埋劑的不同而有所不同。常用的是石蠟切片法、棉膠切片法、冰凍切片法、乙二醇甲基丙烯酸脂法(簡稱GMA法)。石蠟切片法包括固定、包埋、切片、染色、脫水和封固等步驟。關鍵是把生物材料用石蠟包埋，以石蠟為支持物，把浸在蠟塊中的生物材料切成理想的薄片。操作過程為：固定→水洗→從低濃度逐級到高濃度酒精脫水→二甲苯透明→浸蠟→包埋→切片→貼片→二甲苯脫蠟→逐級從高濃度到低濃度酒精處理，最后過渡到水→染色→逐級從低濃度到高濃度酒精脫水→二甲苯透明→樹脂膠封固。其中的基本步驟在各種制片技術中都是相同的。②整體封片法。用于單細胞、微小生物體或分散的器官的整裝制片方法。此法也需要經過固定、染色、脫水、透明和封固各個步驟。草履蟲和昆蟲口器制片即用此法。③涂片法。把易于分散的生物標本涂布在載玻片上的制片方法。血液涂片便是一例。④壓片法。將天然的、易于分散的組織或經過處理后易于分散的組織，如動物的精母細胞、根尖細胞等放在載玻片上、再加蓋玻片，用力壓碎組織，使細胞或細胞內的結構鋪展成一層的制片方法。壓片法常用于觀察染色體，通常用醋酸洋紅、地衣紅和石炭酸復紅染色。