透射電子顯微鏡制片技術
透射電子顯微鏡制片技術 其基本要求是:①盡可能保持材料的結構和某些化學成分生活時的狀態。②材料的厚度一般不宜超過1000埃。組織和細胞,必須制成薄切片,以獲得較好的分辨率和足夠的反差。③采用各種手段,如電子染色、投影、負染色等來提高生物樣品散射電子的能力,以獲得反差較好的圖像。
樣品制備的方法隨生物材料的類型以及研究目的而各有不同。對生物組織和細胞等,一般多用超薄切片技術,將大尺寸材料制成適當大小的超薄切片,并且利用電子染色、細胞化學、免疫標記及放射自顯影等方法顯示各種超微結構、各種化學物質的部位及其變化。對生物大分子(蛋白質、核酸)、細菌、病毒和分離的細胞器等顆粒材料,常用投影、負染色等技術以提高反差,顯示顆粒的形態和微細結構。此外還有以冷凍固定為基礎的冷凍斷裂——冰凍蝕刻、冷凍置換、冷凍干燥等技術。
掃描電子顯微鏡樣品制備技術
掃描電子顯微鏡樣品制備技術 掃描電鏡以觀察樣品的表面形態為主。掃描電鏡樣品的制備,必須滿足以下要求:①保持完好的組織和細胞形態。②充分暴露欲觀察的部位。③良好的導電性和較高的二次電子產額。④保持充分干燥的狀態。
某些含水量低且不易變形的生物材料,可以不經固定和干燥而在較低加速電壓下直接觀察,如動物毛發、昆蟲、植物種子、花粉等,但圖像質量差,而且觀察和拍攝照片時須盡可能迅速。對大多數的生物材料,則應首先采用化學或物理方法固定,脫水和干燥,然后噴鍍碳與金屬以提高材料的導電性和二次電子產額。
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