全自動血型分析儀應用于血站獻血者血型檢測

　　輸血前相容性檢測對于保證輸血安全至關重要，血站對獻血者的血型檢測內容包括ABO和Rh血型，血型鑒定手工法為傳統、經典方法，但操作費時，且在實驗結果判斷及報告過程中影響因素較多，而血站血型檢測標本量大而更易出現血型錯判或漏判等差錯。隨著輸血技術的發展，對血站實驗室大批量標本血型檢測提出了快速、準確和標準化、規范化、自動化的要求。全自動微孔板血型分析儀的問世，實現了全自動化操作，使輸血檢驗操作進入了標準化和網絡化的時代，確保了臨床輸血安全，也更加有保障。筆者對本站采用Xantus全自動加樣器Ak03B數字血型儀和梯形微板整合的一套自動血型檢測系統進行ABO正反定型和Rh(D)血型篩查的應用情況進行總結，現報告如下。
　　1 資料與方法 
　　1.1 一般資料 2011年1月至12月本中心血站采集的無償獻血者全血標本30695例(5 ml/例，EDTA-K2抗凝)，樣本采集后24 h內檢測。
　　1.2 試劑與儀器
　　單克隆抗-A、抗-B(南京欣迪 20100802 上海華泰 201002071
　　201004071 201006071 201101001 20113002)，ABO試劑紅細胞(上海血液生物 20105327 20105329 20115303 20115309 20115329 20115310 20115313 20115317 20115320)，Rh(D)(IgM)試劑(德國BTOTEST 10011170，上海血液生物 20110418)。
　　Xantus全自動加樣器(瑞士)AK03B型數字血型儀(深圳愛康公司)，96孔梯形微孔反應板和96孔紅細胞稀釋用板(深圳愛康公司配送)，HaemoTyper全自動血型分型系統，CAABB血站管理系統。
　　1.3 方法 
　　1.3.1 單克隆抗-A、抗-B及抗-D血清用生理鹽水作1∶12稀釋，用生理鹽水將ABO試劑紅細胞1:2稀釋，將標本用Xantus全自動加樣儀進行掃描、讀取。
　　1.3.2 自動加樣 為避免樣本紅細胞污染血漿，先作反定型，后作正定型和Rh(D)血型，進入HaemoTyper全自動血型分型系統，設定好的反定型、正定型和Rh(D)定型程序，將所需標本、試劑加到專用微孔板上。
　　1.3.3 待機器加好樣本和試劑后，儀器自動將微板移至震蕩懸浮器混勻約20 s，使試劑和樣本充分混勻，室溫靜置約1 h后，用數字血型儀讀板，將HaemoTyper全自動血型分型系統結果傳輸到CAABB血站檢驗管理系統。
　　2 結果 
　　應用全自動血型分析儀檢測30695例標本，因遞形板臟、凝塊過大，紅細胞稀釋濃度不宜，紅細胞沉淀點過大或過小，嚴重脂肪血等原因判讀錯誤而用肉眼或手工試管法修正血型295例，其余為一次性準確判定結果，正確率為99.04%，同時糾正采血前ABO初篩定型錯誤70例，ABO正反不符28例，檢出Rh(D)陰性105例，經本站血型參比實驗室鑒定Rh(D)陰性結果完全相符。
　　3 討論 
　　利用全自動加樣系統進行血型檢測，其吸液加樣方式和紅細胞血液的質量對檢測結果有很大影響，在加樣程序編輯時應注意加樣時的吸樣深度，每份標本紅細胞的比例有差異，為保證加樣針能夠充分吸到紅細胞，將針頭吸樣深度參數設置到試管底部上0.5 cm處，在混勻稀釋板紅細胞懸液時，要防止沖力過大導致孔內液體濺出而污染周邊標本。血清效價和紅細胞濃度也會直接影響凝集反應，影響結果的判斷。因此，用微板法檢測血型試劑必須進行優化。
　　使用全自動血型儀必須做好試劑準備工作，包括紅細胞新鮮配制，無溶血、無霉菌生長、無污染，抗-A、抗-B標準血清及抗-D血清無污染，并且稀釋濃度要求適宜(1∶12稀釋)，否則效價太高，凝集塊太大，不能在孔內均勻分布，凝集塊沉淀于孔底，影響吸光度，使結果不準確，避免遞形板太臟而影響血型結果，遞形板每次使用后，應清洗干凈，最好用摩爾洗液(1∶ 1000)浸泡過夜，次日用清水沖洗干凈，晾干備用。操作過程中，應避免加試劑后形成氣泡，影響讀板，每次結果出來后需要目測微板與數字血型儀結果看是否一致，避免氣泡、脂肪、板底部太臟，有印痕或未干的水漬，加紅細胞量多少或試劑不足等引起的血型錯誤。判讀結果時需注意核對，不能單純依靠儀器判讀結果，必須結合肉眼和經驗甚至手工鑒定。
　　由于全自動血型儀對數字血型拍照結果判斷臨界質都是根據正常的紅細胞血型設置的，在抗原減弱程度不一的情況下，便有可能造成亞型漏檢，對血型正反不符的標本通過經典試管法可以彌補。
　　應用血型自動分析系統，從標本的條碼掃描、標本加樣、分配試劑到結果的判讀、打印，再到應用血型檢驗管理系統登記結果，都用儀器完成，實現了血型檢測工作的程序化、全自動化、標準化和規范化，結果記錄自動打印，原始記錄有標本的條碼、板號、試劑廠商和批號及失效期，數字血型儀讀板結果等重要信息，應用數字血型儀數碼成像并進行數字化處理，簡便、快速，且可保存原始數據，便于追溯，完全實現了自動可監控化，還可設置試劑過期拒絕判讀結果，應用血站檢驗管理系統自動登記結果，避免了人為因素對試劑結果的影響，提高了工作質量和工作效率，減少了檢驗人員職業暴露的機會，尤其適用大批量標本處理，全自動血型檢測技術相關性好，重復性好的優點，降低了實驗工作者強度，節約試劑成本，降低了錯誤的發生率，更易發現鹽水不規則抗體，確保了輸血的安全。