共聚焦激光掃描顯微鏡的應用

膜電位 

以往測定膜電位多用微電極直接插入法測量，不僅操作麻煩，而且對細胞也是一種損傷。共聚焦激光掃描顯微鏡則可利用熒光探針在細胞膜內外分布的差異測出膜電位，不但可以觀察細胞膜電位的變化結果，更重要的是可以用于連續監測膜電位的迅速變化。膜電位熒光探針根據其對膜電位變化反應速度的快慢分為快、慢兩類探針，各類均有10多種。DiBAC4(3)為最常用的膜電位熒光探針，DiBAC4(3)為帶負電荷的陰離子慢反應染料。該探針本身無熒光，當進入細胞與胞漿內的蛋白質結合后才發出熒光，測量時要求細胞浸在熒光染料中。當細胞內熒光強度增加即膜電位增加示細胞去極化；反之，細胞內熒光強度降低即膜電位降低示細胞超極化。Rhodamine 123主要用于線粒體膜電位測量。Rhodamine123是一種親脂性陽離子熒光探針，當線粒體膜內側負電荷增多時，熒光強度增加，與DiBAC4(3)的表示形式相反。