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  • 發布時間:2024-07-15 16:52 原文鏈接: 關于DNA重組的基因表達載體的介紹

      將目的基因與運載體結合的過程,實際上是不同來源的DNA重新組合的過程。如果以質粒作為基因表達運載體,

      首先要用一定的限制酶切割質粒,使質粒出現一個缺口,露出黏性末端。然后用同一種限制酶切斷目的基因,使其產生相同的黏性末端(部分限制性內切酶可切割出平末端,擁有相同效果)。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處,首先堿基互補配對結合,兩個黏性末端吻合在一起,堿基之間形成氫鍵,再加入適量DNA連接酶,催化兩條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵,從而將相鄰的脫氧核糖核酸連接起來,形成一個重組DNA分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸桿菌中的質粒DNA分子結合,形成重組DNA分子(也叫重組質粒)的。

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