一、原理
植物內源激素ABA(脫落酸)能使氣孔關閉,降低葉片蒸騰速率,外源ABA也有同樣的作用。可以用稱量法、鏡檢法直接或間接地測量氣孔開度,以檢驗外源ABA的作用,加深了解ABA的生理功能。
二、儀器與用具
顯微鏡1臺(附接目測微尺);溫箱1臺;感量0.001g天平;25ml燒杯6只;10ml移液管3支;剪刀1把;尖頭鑷子1把;光源;載玻片和蓋玻片等。
三、試劑
1. 100mg/L ABA:10μg ABA溶于100ml水中;
2. 蒸餾水;無水乙醇;
3. 10%醋酸纖維素丙酮溶液:稱醋酸纖維素1g,加純丙酮10ml溶解即可。
四、方法
1. ABA對小麥葉片氣孔開度的影響
(1)取樣:選擇照光培養,生長均勻,約10天苗齡的小麥,取第一麥葉為材料,剪取長10cm切段共60段。
(2)設置處理:取6只25mL燒杯(直徑盡量一致),分成三組,每組2只,按下表進行處理,即第一組每杯加蒸餾水10mL,第二組每杯加蒸餾水10ml和小麥葉片15段,第三組每杯加10mg/L的ABA溶液10mL和小麥葉片15段,均將葉片切段的基部插在溶液中。
(3)第一次稱重:將上述各處理燒杯稱重,記錄原初重量。
(4)第二次稱重:將6只燒杯放在3000lx的光源下,照光2h后再稱一次重量。
(5)計算與比較:將兩次稱重結果分別填入表中,計算與比較三種處理的蒸發量,分析ABA對氣孔開度和蒸騰的影響。
注意事項:處理2與處理3各燒杯中插的麥葉切段盡可能一致。
2. ABA對蠶豆葉片氣孔開度的影響
(1)取蠶豆倒2或倒3復葉的葉片2張,分別放入5ml蒸餾水(對照)和5ml 10mg/L ABA溶液中,每種處理設2個重復。
(2)放在3000-4000lx燈光下照光2-3h。
(3)觀察(任選以下一種方法)。
A. 活體觀察:用帶有接目測微尺的顯微鏡,觀察氣孔的開度,測量孔徑大小。
B. 剝表皮觀察:用鑷子撕下靠近中脈處的下表皮,立即放入無水乙醇中固定,然后放在載玻片上,蓋上蓋玻片在顯微鏡下觀察測量各處理的氣孔開度。
C. 印跡法:用10%醋酸纖維丙酮溶液涂在葉子下表皮,待干后取下,置顯微鏡下測量。
五、根據測量結果,分析ABA對氣孔開度的影響
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