化學發光免疫分析室內質量控制的體會

作者單位：江蘇省無錫市人民醫院檢驗科,江蘇無錫214023

我科在2003年5月引進Access全自動微粒子化學發光免疫分析儀，該儀器由美國BECKMAN COULTER公司和法國PASTURE研究院合作設計生產，采用磁性微粒子分離和酶放大化學發光分析技術，具有方法學先進、精密度高、準確性好、測試速度快、配套試劑有效期長、軟件設計合理、人機對話操作方便等優點，深受廣大用戶好評。該儀器主要用于甲狀腺功能、性腺激素及其他內分泌激素的檢測，使分析質量和檢測效率得以大幅提高。雖然自動化分析系統有效降低了手工操作、反應條件等造成的誤差，但是影響檢測結果的因索是多方面的，進行嚴格的質最控制是必要的。質控分為室內質控和室間質控，前者是基礎。應包括從標本采集儲存、儀器維護、分析檢測到報告審核的全過程。本文作者根據多年實踐經驗就日常工作中如何保證檢測質量闡述如下。

l標本的采集與保存

1.1 采血時間的選擇一般采血時間以早晨空腹為宜，需經常復檢者應盡莓固定每次采血時間。具有晝夜節律性的激素應注明采血時間，如Cortisol、ACTH、PRL、睪酮等；女性激素如E：FSH、LH、P等應注意月經周期的變化；呈脈沖分泌的垂體激素如PRL、GH、ACTH等可采用間隔15分鐘分三次抽血后分別檢測。

1.2標本的分離與貯存一般標本采血后置室溫下待血清自然析出后分離血清，室溫較低時可放水浴箱孵育30min后分離血清；對溫度較為敏感的待測物質如ACTH、INS、C—P等采集與保存應在低溫條件下完成；有些血樣的采集需加入特殊抗凝劑。對于普通標本，三天內完成檢測的置46C保存，否則冰凍保存。標本可置冷水浴中復融，檢測前注意充分混勻，應避免反復凍融。

1.3溶血標本影響結果的原因大量紅細胞溶解影響被測物質濃度；紅細胞內所含酶釋放對待測物的破壞作用。脂血標本因脂質影響抗原抗體結合從而影響檢測結果。

2儀器維護與保養

2.1 日保養每天檢測前清潔儀器表面及桌面，檢查系統溫度狀態、系統液路部分和系統耗材部分是否符合要求，按主屏保養程序進行主針及管路清洗。

2.2周保養做儀器內部清潔工作，清潔主探針外表面。用無纖維刷子清潔孵育帶及反應管感應點。用l號杯加堿性溶液，2號杯加稀釋酸性溶液，3號杯加去離子水，按主屏程序作系統清洗。

2.3月保養用專用小刷子捅洗主探針、2、4、6號針，清潔底物針外部，同周保養作三杯系統沖洗。然后作系統檢測，l號杯加入未稀釋系統檢測液，2號杯加入清洗緩沖液，3號杯為空樣品杯，4號杯加入l：5稀釋系統檢測液，按操作程序進行系統檢測。系統檢測數據應在控制范圍內，主要數據如下。1號杯：CV of Washed RLUS必須小于等于12％，RLUS均值為5000—20000，如檢測結果超出此范圍，需要檢查RV的清洗與混勻系統功能；3號杯：CV of Substrate RLUS必須小于等于5％，RLUS均值在5000—9000之間，檢測結果RLUS值不能有明顯衰減，如果有衰減則說明由于吸液針清洗不足導致了交叉污染；4號杯：CV of Washed RLUS必須小于等于12％，RLUS均值為4000000一8000000之間；若檢測結果超出此范圍。說明系統檢測液稀釋比例不當或主探針精密度需要檢查。

3標準曲線的校正

以下情形需要校正標準曲線：①不同批號試劑之間存在差異，在新批號試劑使用前必須進行定標。②標準曲線過期或質控值超出控制范圍。標準曲線漂移是引起發光免疫分析系統誤差的原因之一，由于各檢測項目試劑穩定性和檢測原理不同，標準曲線穩定性差異較大，一般情況下夾心法穩定性好于競爭法。在實際操作中可依據標準曲線的有效期來進行標準曲線的校正，或參照質控結果來決定是否需要校正標準曲線。由于發光免疫分析檢測成本較高，為了降低校正頻率，節省成本，可計算連續三次中值質控血清結果的均值，如果超出質控均值-t-2s，則需要重新校正標準曲線。③儀器相關部位經過較大維修、配件更換或緩沖液等試劑的升級。