原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養,此時的細胞保持原有細胞的基本性質,如果是正常細胞,仍然保留二倍體數。但實際上,通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。[1]
最常用的原代細胞的培養有組織塊培養和分散細胞培養。
組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入培養基后進行培養。
分散細胞培養大致步驟為:
將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。
近日,中國農業科學院飼料研究所科研人員研究創新了一種簡單、快速的鴨胚肝臟原代細胞分離和培養方法,并研究了鴨胚肝臟原代細胞膽堿缺乏模型中的基因可變剪切,為鴨膽堿與基因結構的相關性研究提出了新的見解。相關......
一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察,發......
取人或動物體內(或胚胎)的組織,將其剪碎至1mm3的組織塊,再采用的如下方法進行分離培養:一、懸浮細胞的分離方法1、將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。2、......