含甲酰胺的聚丙烯酰胺凝膠的制備實驗

本方法包括方案 8 中所有物品 加上： 甲酰胺（100%)

材料

本方法包括方案 8 中所有物品，加上：
甲酰胺（100%)

方法

1. 依方案 8 步驟 1~8 淸洗并安裝玻璃板制成膠模。

2. 在實驗桌的工作區上鋪上襯塑料的保護紙。
灌制測序凝膠時幾乎不可避免將丙烯酰胺溶液滴于桌面，可準備一個大托盤對其進行收集。

3. 在一個 250 ml 有臂錐形瓶中配制適當濃度的丙烯酰胺溶液（表 12-20)。這些溶液足夠配制一塊 40 cmx40 cm 的測序凝膠。
重要：凝膠的配制必須一氣呵成，中堿間不能斷斷續續。

4. 混合所有試劑，在 55°C 水浴中加熱 3 min 幫助尿素溶解。
溶解尿素的過程十分緩慢，必須依靠外部加熱。

5. 從水浴中取出溶液，冷卻 15 min 至室溫。不斷攪拌混合物。加水到 100 ml。

6. 把燒瓶放在真空裝置里抽去氣體。
防止聚合時產生氣泡，該過程會產生熱量。

7. 把溶液放入 150 ml 玻璃燒杯中。加 3.3 ml 新制的 1.6% 的過硫酸銨，輕輕攪動溶液使試劑混勻。



8. 加 50ul TEMED，旋動容器以混勻溶液。直接配膠或者用 60 ml 注射器吸取 40 ml 上述溶液。注意，不要有氣泡。

9. 依方案 8 中步驟 16~22。
重要：由于甲酰胺減慢了聚合速度, 聚合常需要 2~3 小時。