在HPLC分析中,死時間Tm的測量是一個比較困難的問題,這也直接影響了高精度kovats保留指數在HPLC中的應用。死時間表示了一個在高效液相色譜固定相上未被滯留組分的保留時間,由于高效液相色譜立法的多樣性,很難找到像氣相色譜那樣選擇空氣或甲烷為測量死時間的通用探針,其實平時分析時用這個死時間的意義不大,我覺得你知道就行!但我還是告訴大家如何來測。
1.由色譜柱的結構參數進行計算
Tm=(柱長度*柱截面積*總孔率)/流動相流速
其中柱長度為cm,柱截面積為cm2,總孔率(對全多孔固定相為0.84,對化學我鍵合和離子交換為0.75),流速cm3/s
2.用色譜柱的操作參數進行計算
Tm=(柱阻抗因子*流動相動力粘度*柱長度的平方)/(柱壓力降*固定相粒徑)
3.依據經驗公式計算
(1)對全多孔固定相
Tm=(柱長度*柱內徑的平方)/(1.5*流速)
(2)對非多孔固定相
Tm=(柱長度*柱內徑的平方)/(3.0*流速)
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