Fermentas公司的研究表明，限制性內切酶在 PCR擴增體系中仍然有部分活性，可以通過稀釋（3倍以上）擴增混合液，適當提高酶量和反映時間，進行酶切。
個人認為需要對PCR產物進行酶切分析通常是為了或基因表型分析，由于Taq，Pfu等高溫聚合酶在酶切溫度（37度或更高）下，仍然保持一定的活性，高溫聚合酶所具有的聚合或無模板添A或外切修正的功能仍在一定的程度上表現出來，可能會影響到酶切產物末端的正確性。結果是要么裝不上去，要么裝上去切不下來，測序發現末端引物堿基少了。
正確安全的做法是先通過瓊脂糖電泳回收產物，然后酶切，酶切可以適當提高酶的用量。一般的做法是從50ulPCR反應中回收的產物，溶解于45ul水中，加入酶，酶切后的產物通過從溶液中回收DNA的方式直接回收，不需要跑瓊脂糖電泳。
PCR擴增后一般進行瓊脂糖凝膠電泳分析，電泳后一般有以下幾種條帶：1、引物帶。引物濃度過高或是擴增效率不是特別高時都會有，一般不呈現為細帶，為發散狀；如果目的擴增產物帶和引物帶都很亮，可以考慮適當降低......
在基因組測序中，PCR擴增似乎是繞不過去的一步。然而，PCR也帶來一些問題，包括不均勻擴增，導致某些序列的比例過高。對目前的新一代測序（NGS）平臺而言，測序某些堿基組成上存在嚴重偏向的基因組區域仍是......
近幾年，隨著全球微生物耐藥及病原體突變問題凸顯，傳染性疾病體外診斷已成為各大醫藥科技公司的學術攻關熱點之一。每當出現一種新型傳染性疾病或者一種新型篩查手段時，疾病檢測診斷市場總會再度滿血復活，開啟全新......
摘要采用微波諧振腔對細胞色素c以及牛血清白蛋白進行微波輔助酶解,通過電噴霧三級四極桿質譜對得到的肽段進行分析,證明該方法可用很低的微波功率將蛋白質徹底酶解為多肽.通過調整微波條件可以使蛋白質的酶解效率......
以凝血酶適體(aptamer)為例,利用適體和核酸外切酶特性,通過定量PCR擴增建立一種高靈敏的蛋白質檢測方法.首先合成3段寡核苷酸序列即凝血酶適體探針,上游連接子和下游連接子.將適體探針與凝血酶溫育......
本方法適用于序列已知的蛋白質的突變點確證不包括Leu-Ile之間的突變和Lys-Gln之間的突變。......
本方法適用于重組人腫瘤壞死因子衍生物3a突變區的氨基酸序列分析，采用蛋白質工程技術使天然腫瘤壞死因子(TNF)分子發生突變以期能獲得高活性低毒的衍生物便于臨床推廣使用。......
酶切反應系統包括：DNA，酶，buffer，滅菌水。不同公司的酶和buffer系統是不同的，所以一個反應應該用同一個公司的酶和buffer(常識)。NEB和promega的酶都不錯的，我們常用的酶是N......