如何計算顯微鏡下視野面積

 在顯微鏡下進行病理讀片,是病理醫師工作中的重要內容之一。顯微鏡觀察和記錄的結果是臨床診斷的科學依據。正確標準的使用顯微鏡, 觀察和記錄讀片結果才具有科學性。眾所周知, 顯微鏡的成像首先是由物鏡對標本放大成像,然后由目鏡一次放大被人們肉眼觀察到。所能呈現圖像的視野大小是由目鏡的視場數決定的。需要說明的是, 本篇所闡述的觀察和記錄, 于通過目鏡的顯微鏡觀察和記錄。不經目鏡觀察的其他光路采集記錄圖像, 如 CCD、 數碼相機、 由軟件操作采集圖像等另述。顯微鏡目鏡的視場數( field number, FN) 不同, 鏡下能看到的視野大小就不同,不同的面積區域對鏡下陽性率計數有影響,我們應該了解目鏡視數與視場面積的關系。視場數小能看到的視場面積就小, 反之, 視場數大則能看見的視場面積就大。

1  目鏡視場數的標識 

       顯微鏡設計和生產具有國際化標準,在顯微鏡的目鏡上都會標識視場數, 如奧林巴斯 BX50 型顯微鏡, 目鏡視場數22( 22 數值前的英文和數字標識是目鏡分類名和倍率) 。

2 實際視場和計算公式

       在標本平面上,顯微鏡能夠觀察到的區域( 圓形區域) 叫做實際視場,也稱視野。用以下公式計算可得知面積大小。

3 物鏡倍率

       物鏡是用于顯微鏡成像的重要光學部件。生物顯微鏡常用物鏡倍率有 4   、 10  、 20   、 40   和100  。病理學計數常用的高倍物鏡是指 40   。

4 中間倍率

       直接通過目鏡觀察無需考慮中間倍率。中間倍率是指加在光路中的 CCD 接口、 攝影目鏡以及CCD 元件等的倍率。因為現在使用的顯微鏡大都是無限遠成像系統, 附加有熒光觀察、 本差觀察、 微分干涉觀察等, 元件不會改變倍率, 不需要考慮。

5 常用目鏡下的視場面積

       zui常用目鏡視場數是 22。各顯微鏡制造商相繼設計生產有視場數是 25 的寬視場目鏡, 視場數是 26 5 的超寬視場目鏡。也有視場數是 18、 20 的較小視場數的目鏡。