如何高效地感染原代細胞

　　原代細胞的感染一直是個麻煩的事情。把一個基因導入到細胞里，有4個常用的方法。

　　1、質粒+轉染試劑。質粒轉到細胞里面是需要借助轉染試劑才能進細胞的。普通細胞可以采用這種方法，但這種方法對原代細胞來說，轉染效率不高。

　　2、質粒+電轉儀。電轉的轉染效率比加轉染試劑的會高。只是電轉儀比較少實驗有，并且電轉時候造成細胞膜損壞，細胞死亡率高。

　　3、慢病毒。慢病毒容易包裝，許多人會用來嘗試感染，但大部分感染效率不會特別好。

　　4、腺病毒，是感染原代細胞的好幫手。腺病毒有ad5和ad5F35兩款。

　　ad5：平常所說的普通腺病毒，它感染細胞是通過自己的纖突蛋白與細胞受體CAR結合來實現的。感染原代細胞能力比慢病毒高很多。

　　Ad5F35：他跟ad5的區別是，受體結合位置的纖突（Fiber）改造成了Ad35型腺病毒的纖突。因此Ad5F35，其感染細胞受體從Ad5的CAR變成了CD46。CD46在絕大部分人源的細胞中都存在。在Ad5轉導效率較低的CD34+細胞，比如造血系統細胞和干細胞上，Ad5F35也有非常好的感染效率。Ad5F35對造血系統細胞、干細胞、免疫細胞，感染效率都不錯，例如DC細胞，jurkat細胞。

　　結論：感染原代細胞首選腺病毒。