層析新知：層析技術進步發展期

上世紀60、70年代是色譜/層析技術快速發展的時代，首先是層析介質有了飛速的發展，各種人工合成的介質出現，如硅膠、聚苯乙烯二乙烯基樹脂、瓊脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺等樹脂或凝膠的出現，極大地拓展了層析技術的應用領域和范圍，基于不同介質的層析方法也如雨后春筍般不斷涌現。如Bio-Rad公司于上世紀50年初推出的分析級離子交換樹脂AG系列，廣泛用于各種分子物質的分離純化，包括無機離子、有機酸、核酸以及糖類等。值得一提的是，上世紀4、50年代正是DNA、RNA研究如火如 荼的時期，而Bio-Rad推出的AG系列樹脂在核酸純化方面具有極其出色表現，受到眾多研究人員的歡迎與好評。

                                                                       

Bio-Rad AG系列樹脂

此外，因為馬丁（Martin）和辛格（Synge）的鉆研與暢想，他們的預言分別在1952年及20世紀60年代被人們所應證。而馬丁（Martin）和辛格（Synge）兩人也于1952年被授予諾貝爾化學獎。

Bio-Rad專家介紹：其中設想1“流動相可用氣體代替液體，因為與液體相比，分離時候，物質間作用力更小，對分離也就更有好處”也就是氣相色譜儀(GC)，即以氣體作為流動相的色譜法，1952年誕生，目前，該法已被廣泛應用于分離和分析復雜的多組分混合物。特別是揮發性物質，我們都知道揮發性物質在實驗或分離時會受到干擾，而氣相色譜儀的產生給揮發性的化合物的分離測定帶來了劃時代的變單。

設想2“若能夠使用非常細的顆粒填料，并在色譜柱兩端施加較大的壓差，從而增加了理論培板數，這將會大大提高分離效率。”也就是高效液相色譜HPLC，20世紀60年代末誕生，現在高效液相色譜HPLC已成為化學、生物化學與分子生物學、醫藥學、農業、環保、商檢、藥檢、法檢等學科領域與專業最為重要的分離分析技術，是分析化學家、生物化學家等用以解決他們面臨的各種實際分離分析課題必不可少的工具。

高效液相色譜的優點是：檢測的分辨率和靈敏度高，分析速度快，重復性好，定量精度高，應用范圍廣。適用于分析高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差的化合物。其缺點是：不能很好地兼容生物緩沖系統，因為HPLC系統通常采用不銹鋼材質，因此具有良好的有機溶劑耐受性以及高壓力承受。但是生物緩沖系統往往涉及到各種不同濃度的鹽溶液，比如最常用的磷酸鹽緩沖液等，而不銹鋼系統不能耐受鹽腐蝕，因此為了滿足生物研究中樣品的快速分析、分離，蛋白質快速層析技術應運而生。

蛋白質快速液相層析（Fast Protein Liquid Chromatography），基于HPLC技術，但又有別于HPLC，它的主要液體接觸部件均采用生物鹽溶液耐受的塑料或者橡膠，這樣能夠極大地降低緩沖鹽對系統的腐蝕，如Bio-Rad最早一代層析系統Biological LP，正是為了滿足70-80年代間快速發展的生命科學領域內對未知組分、物質的分離、純化的需求應運而生。在其誕生之初，風靡北美。

下期，伯樂生命bio-rad專家將為大家帶來21世紀層析法特點及先進層析系統，敬請關注！

如今的色層分析法經常用于分析、分離無色的物質，已沒有顏色這個特殊的含義，但色譜法或色層分析法這個名字仍保留下來沿用。

現在我們簡稱為色譜法、層析法或色譜技術、層析技術。