不同的儀器軟硬件操作方法有所不同,但其原理和主要步驟基本相同,都包括開機預熱、參數設置、工作曲線繪制、樣品測定等步驟。
⑴ 操作面板功能介紹 操作面板位于顯示屏正下方,主要由4個功能鍵、10個數字鍵、4個光標移動鍵及其它按鍵組成,各按鍵功能見下表。

(2) 開機預熱 按儀器操作規程開啟儀器,對未連接電腦的UV minil240紫外可見分光光度計,其開機比較簡單,只需要打開儀器主開關 (儀器背面) ,同時儀器操作面板右上角電源示燈 (POEWER) 亮,并進入初始化,等儀器對LSI等自檢完成 (10個OK全部出現) ,并有提示音響后進入模式菜單 (Mode Menu) 。儀器一般需預熱0.5h。
(3) 方法參數的設置與保存 儀器自檢完成后顯示模式菜單 (Mode Menu) ,按數字鍵“3”,進入定量菜單(Quantitation),按標準方法設定有關方法參數,具體包括:
①設置測量波長等參數,按數字1進入設置,再按數字l選擇單波長測量方式,然后輸入測量波長,再按Enter鍵返回定量菜單;
②設置校準工作曲線參數,按數字2進入設置,按數字3選擇多點校正 (Multi—point calib) ,再輸入校正點數 (No.of std = ?),一般至少需5個點以上,方程次數(order = ?),一般采用一次線性方程,輸人數字1,截距是否設為零(1=No ,2=Yes),一般不設為零;
③設置樣品吸光度平行測定次數,按數字3進入設置,再輸入測量次數,一般1~3次;
④設置單位 (工作曲線橫坐標溶液濃度的單位) ,按數字4進入設置,一般輸入數字9設為μg/mL;⑤結果打印,按數字5可切換打印。
各方法參數設置完后,再按“F4”鍵(SavParam),屏幕顯示數據文件清單后,按“F2”鍵 (Save) ,輸入未使用的數字序號,再輸入該方法參數文件名稱字符,最后按“F1”鍵 (End),存盤結束。
(4) 工作曲線的繪制 儀器穩定并設好相關方法參數后,即可開始吸光度測量。首先對儀器調零,按“AUT0 ZERO”鍵,聽到響聲,即儀器自動調零。再把空白試劑加入比色皿中,放進比色槽,蓋上箱蓋,按“AUTO ZERo”鍵,聽到響聲,即空白儀器自動調零。
按“F2”,進入新的校準 (或直接按“START”鍵),按順序輸入校正溶液濃度,每次輸入完成后應用“’ENTER”確認,輸入完畢,選用數字鍵“1”,直接輸入校正溶液吸光度;選用數字鍵“2”,按輸人濃度順序依次放入對應的校正溶液,按“START”測量各校正溶液吸光度。按“RETURN”鍵,退回定量菜單,按“F1”可顯示工作曲線。按“F4”顯示方程式和工作曲線的有關參數,該數據應在繪制甲醛工作曲線記錄表上記錄,一般使用有效期為1個月,日常樣品測定時,應保證每批樣品測定時必須進行一個質量控制樣品的測定。測定溶液吸光度時,一定要用溶液潤洗比色皿內壁幾次,以免改變溶液的濃度。另外,在測定一系列溶液的吸光度時,通常都按由稀到濃的順序測定,以減小測量誤差。
(5) 樣品測定
① 調用方法參數 儀器開機預熱后,可開始測試。如需重新校正儀器 (繪制新工作曲線) ,則按前述步驟操作,如采用已保存在儀器中的工作曲線,則應先調出相應的工作曲線,具體操作方法如下:在模式菜單屏幕按“F1”鍵 (Params) ,進入方法參數文件列表窗口(Param file list),顯示數據文件清單,按“F2”鍵,輸入工作曲線名稱對應的數字序號。
② 測定空白試劑和空白試樣的吸光度 按“AUTO ZERO”鍵,聽到響聲,即儀器自動調零。向比色皿中加入蒸餾水,放進比色槽,蓋上箱蓋,按“AUTOZERO”鍵,聽到響聲,即蒸餾水自動調零 (用水作對照);再向比色皿中加入空白試劑,放進比色槽,蓋上箱蓋,按“START”鍵測定空白試劑的吸光度(Ab);按同樣操作測定空白試樣的吸光度(Ad),立即記錄其吸光度。測定空白試劑或試樣空白吸光度可反映試劑及樣品對測試結果的影響程度,必要時還須對試樣的吸光度進行校正,以保證測試的準確性。
③ 樣品測試把空白試劑加入比色皿中,放進比色槽,蓋上箱蓋,按“AU—TO ZERO”鍵,聽到響聲,即空白試劑自動調零;把顯色后的樣品溶液加入比色皿中,放進比色槽,蓋上箱蓋,按“START”鍵進行測試,每次測試結果由屏幕直接讀取,結果記錄在專用的記錄單上,以算術平均值表示最終結果。
④ 結果保存 樣品吸光度測完后,在數據顯示屏幕中按“F2”鍵 (Data file),再按“F2”鍵 (Save),進入數據文件列表窗口 (Data file list),輸入可使用的結果數據保存的文件數字序號,再輸入文件名稱字符,最后按“F1”鍵 (End),存盤結束。
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