巨細胞病毒IgM抗體檢測標準操作過程

[前言]巨細胞病毒（CMV）亦稱巨細胞涵體病毒。由于感染的細胞腫大并具有巨大的核內包涵體而命名。CMV在人群中感染廣泛，是最常見的先天性感染病毒，其通過胎盤侵襲胎兒，引起宮內感染，臨床表現為肝脾腫大、血小板減少、溶血性貧血，甚至引起畸形或死胎。由于CMV引起的先天畸形常在生后幾個月-幾年中表現癥狀，主要為智力低下。因此，檢測CMV對優生優育學有重要意義。檢測抗-CMV?IgM近期感染的診斷。            
[原理]本試劑盒先用吸收液去除IgG，再檢測人血清或血漿中的抗-HSV-Ⅱ?IgM，消除假陰性。具有簡便、快速等優點。 
[試劑廠家]深圳市綠瀚生物技術有限公司                   
[試劑盒組成]
1、包被板條                                                    
2、定標液                                                    
3、陰陽對照血清                 
4、酶結合物                     
5、底物
6、顯色液
7，終止液
8，洗滌液
9，吸收液                         
[試劑的穩定性與貯存]試劑自生產日起避光貯存于2-8℃,有效期內穩定。     
[標本的收集與處理]標本為無溶血血清。          
[操作步驟]                      
1，樣本稀釋：用血清稀釋液1：41稀釋定標液、質控、血清，取稀釋定標液、質控、血清150ul于另一管中，加吸收液150ul，徹底混勻，室溫（21-25℃）靜置20+/-5分鐘。
2，加樣：取包被板，加入吸收稀釋定標液、質控、血清樣本各100ul。并設空白對照一孔，室溫（21-25℃）靜置20+/-2分鐘。甩去，加洗滌液一滴，蒸餾水洗滌5次，拍干。
3，反應：加酶結合物100ul，室溫（21-25℃）靜置20+/-2分鐘。甩去，每孔加洗滌液一滴，蒸餾水洗滌5次，拍干。
4，顯色：每孔加底物和顯色液各100ul，室溫（21-25℃）靜置10+/-2分鐘。以陽性對照出現明顯藍色為準。
 
[結果判定]                 
1、目測法：在白色背景下觀察各孔顏色，明顯蘭色為陽性，無色或極淡蘭色為陰性。
2、酶標儀檢測（選擇波長450nm）：每孔加終止液一滴，用空白孔校零，測定各孔OD值。
臨界值（C.O.）=2.1×陰性對照OD值
（1）樣本OD值S/C.O.≥1.0判為陽性；
（2）樣本OD值S/C.O.＜0.9判為陰性。
（3）樣本OD值S/C.O.介于0.9與1.0之間，判為可疑，需重復檢測。
注：（1）當陽性對照/陰性對照OD值≥5時，試驗結果有效；
（2）陰性對照OD值小于0.05時，按0.05計算；大于0.05時，按實際值計算。 
[質量控制]
為確保測試結果準確可靠，每批測試均應放置陰陽性質控血清與被檢樣品同時測試，用以檢查試劑性能。
[注意事項]                 
1、不同批號的試劑不可混用。
2、試劑盒用前先平衡至室溫。含血球的標本易出現假陽性，應避免使用。
3、未用完的板條應及時封存于易封袋中。
4、滴加試劑前，應將滴瓶翻轉數次混勻。滴加時瓶身應保持垂直。
5、試劑盒置于2-8℃貯存，有效期6個月