布魯克：微生物鑒定技術——MAIDIBiotyper

　　微生物是一群神秘的小東西，因為你既看不見也摸不著，但是有時候它卻關乎你的生命。一次術后的感染，一次吃壞東西，又或者是一次瘟疫等等，這些都有可能會要了你的小命。所以微生物的檢測與控制絕不容小覷。

　　 2015年8月12日，第三屆全國制藥企業質量控制技術論壇在北京召開。在《微生物檢測與質量控制技術》論壇上，我們看到了一款微生物鑒定的新平臺——MAIDI Biotyper。

　　眾所周知，布魯克是世界MALDI-TOF技術的領跑者，早在2004年推出了MALDI Biotyper作為研究工具。到了2013年布魯克已售出了1000臺MALDI Biotyper。布魯克的MALDI Biotyper采用的是MALDI-TOF質譜儀采集微生物的獨特的蛋白分子指紋圖譜，再配以布魯克的軟件、耗材和輔助產品。使得MALDI Biotyper系統已成為世界范圍內臨床微生物的領先解決方案，在水的檢測，制藥和食品檢測行業也有重要影響。

布魯克應用技術支持張欣怡博士

　　從懷疑到認可

　　“自從MALDI-TOF進入微生物領域之后，一開始大家都是持懷疑的態度，但是到現在大家已經慢慢認可了。”布魯克應用技術支持張欣怡博士如是說。“我們今年有統計過單純用MALDI-TOF作為微生物鑒定的在全球已經有1700多家了。”

　　MALDI Biotyper的工作流程的設計力求穩健且易于操作。將分離純化之后的菌落挑取一點加入耙板，開始檢測，MALDI Biotyper檢測一個樣品只需要幾秒鐘。之后，再與數據庫中的標準指紋圖譜進行比對，得出鑒定結果。整個鑒定結果到出完整的圖譜只需要幾分鐘的時間。

　　MALDI Biotyper采用MALDI-TOF（基質輔助激光解析電離-飛行時間）質譜儀，在細菌進入質譜儀之后，激光轟擊細菌，使其形成質子化，在真空飛行管中飛行，并最終打到檢測器上。形成質譜圖。現在測定的大多數細菌蛋白都為核糖體蛋白，是非常穩定的蛋白。

　　MALDI Biotyper配套的分析軟件采用紅‘紅綠燈’式鑒定結果，分值大于2.000表示可信度非常高，鑒定到種的水平，為綠色；1.70-1.99之間需要通過補充方法來確認，鑒定到屬的水平，為黃色；小于1.70表示鑒定結果不可靠，紅色。非常清晰直觀。數據庫中包括革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、酵母菌、絲狀真菌等。總共有菌種2371種，菌株條目5989種。后期還在繼續研究開發，以適應各方面的微生物。

             

布魯克MALDI Biotyper

　　經受住了多重考驗

　　在會議上張欣怡博士總結了MALDI Biotyper在微生物鑒定中的幾大優勢：1、操作簡單、快速，每個樣品測定時間僅需20s，每小時可測150個樣品；2、樣品需求量少，只需約0.25ng-0.5ug的生物樣品；3、更快、更準、更省錢，快速、高通量檢測成本低廉，結果準確，分辨率高，簡單易用，無需過多的專業知識；4、適用面廣泛，可以測革蘭氏陽性、陰性菌、酵母菌、絲狀真菌等；5、培養條件影響甚小，不同培養基培養的細菌質譜圖幾乎一致；6、軟件功能，清晰直觀，用戶可以自建庫；7、重復性好，高達98.7%。

　　MALDI Biotyper幾乎可以應用于任何領域的微生物鑒定。在MALDI Biotyper應用之初，Pfizer制藥企業對這套儀器進行了準確性與重復性的檢測考察。考察的結果是Pfizer公司購買了布魯克的公司的MALDI Biotyper系統。英國的Quotient公司微生物實驗室也大規模的評估了布魯克的MALDI-TOF技術。評估結果是Biotyper可提供快速、可靠、高重復的鑒定結果，建議臨床檢驗科和第三方實驗室用MALDI-TOF技術取代傳統方法。北美一家大型化妝品廠，面霜發生污染。所以這家公司對水源和被污染的面霜同時用布魯克的MALDI-Biotyper和傳統方法進行鑒定，最后得到的結果是API未鑒定出任何細菌，Vitek2只鑒定出被污染的面霜，RiboPrinter與Biotyper鑒定結果一致。可見布魯克產品Biotyper的準確性。

　　目前，布魯克MALDI Biotyper在中國最大的用戶群是醫院，部分為食品領域，還有第三方檢測，部分藥檢所也將其作為微生物鑒定的手段。