應用慢病毒載體檢測CRISPRCAS9和TALEN脫靶

　　近日，國際生物學期刊nature biotechnology在線刊登了美國科學家的一項最新研究成果，他們應用整合酶缺陷的慢病毒載體（IDLV）檢測CRISPR-CAS9和TALEN對基因組造成的脫靶效應，最低可檢測1%的脫靶頻率。這項研究或對推廣CRISPR-CAS9和TALEN技術，保證基因操作的準確性具有重要意義。

　　目前，CRISPR-CAS9和TALEN技術已經廣泛應用在基因操作平臺，但脫靶效應一直是科研人員應用這兩項技術面臨的最大擔心和問題，脫靶會造成基因組的不穩定并會擾亂正常基因的功能。在之前的一些工作已經發現一些方法可以預測篩選脫靶位點，但這些研究方法都不能在體內很好匹配體外的預測結果,因此如何提高預測的準確性，優化預測方法成為推廣應用CRISPR-CAS9和TALEN技術必須要解決的問題。

　　之前幾個研究小組已經報道，雙鏈IDLV能夠通過非同源末端連接的方法特異性插入到基因組雙鏈斷裂DNA上，這種策略使體內標記核酸酶產生的雙鏈斷裂DNA成為可能，并被用于檢測鋅指核酸酶的脫靶切割位點。因此，Xiaoling Wang等人將IDLV用于衡量CRISPR-CAS9和TALEN的脫靶活性。

　　綜上所述，該文章通過整合酶缺陷的慢病毒載體(IDLV)檢測了CRISPR-CAS9和TALEN的脫靶效應，并對這兩種技術的脫靶效應具有很高的檢測效率。這項技術的應用或為推廣CRISPR-CAS9和TALEN技術，保證基因操作的準確性起到重要推動作用。