當外泌體遇上環狀RNA（一）

文章導讀
外泌體是細胞分泌的大小為30-200nm的盤狀囊泡，它在人體體液中分布廣 泛。2013年，科學家通過研究外泌體細胞囊泡調控機制獲得諾貝爾獎，這使外泌體開始被廣 泛關注，隨著研究的深入，人們發現外泌體可作為細胞間信息交流的橋梁，在細胞間往來穿梭進行信息傳遞。另外，外泌體與疾病的發生尤其是在腫 瘤中起到十分關鍵的作用，因此，外泌體也成為了研究疾病以及靶向治 療的切入點。
盡管外泌體的研究十分火熱，但前期研究主要集中在外泌體的信息傳遞以及外泌體中microRNA的作用機制等方面，關于外泌體中環狀RNA的研究仍方興未艾，今 天小編就近日新發表的三篇外泌體環狀RNA高 分文章進行解析，希望能夠使大家對外泌體中的環狀RNA的研究有一些新的認識。

文章展示
1.肝ai細胞來源的外泌體circUHRF誘導自然殺傷細胞的衰竭，影響抗PD1治 療的耐藥性
發表期刊：Molecular Cancer
影響因子：15.302
發表時間：2020.6.27
文章鏈接：Cancer cell-derived exosomal circUHRF1 induces natural killer cell exhaustion and may cause resistance to anti-PD1 therapy in hepatocellular carcinoma
2020年6月27日，Molecular Cancer（IF=15.302）雜志上發表了一篇題為“Cancer cell-derived exosomal circUHRF1 induces natural killer cell exhaustion and may cause resistance to anti-PD1 therapy in hepatocellular carcinoma”的文章，文中對肝ai（HCC）細胞分泌的外泌體中circUHRF1的研究發現，circUHRF1可以通過與miR-449c-5p形成海綿機制從而影響其下游基因TIM-3的表達，結果顯 示抑 制自然殺傷細胞（NK）功能并提高了抗PD1免疫療法的耐藥性。
（1）circUHRF1在肝ai組織中表達上調
通過環狀RNA測序數據分析得到UHRF1在肝ai組織中表達上調，并在其病理過程中起重要作用。后通過qPCR技術檢測HCC中的標志基因UHRF1來源的14個circRNA，發現hsa_cic_0048677(circUHRF1)是肝ai組織中表達量第 一高的環狀RNA。并且在HCC組織中circUHRF1的表達高于非腫 瘤組織。臨床生理表型顯示circUHRF1表達高的患者中腫 瘤體積較大，血液中NK細胞比例較低，微血管浸潤較多。Kaplan-Meier生存分析顯示，circUHRF1高表達患者伴隨臨床預后不良。綜上所述，HCC細胞中circUHRF1表達上調與患者預后不良相關，并表明circUHRF1表達上調可能參與了HCC的進展。

（2）肝ai細胞可以通過外泌體分泌circUHRF1
作者從六種肝ai細胞系中分離并利用電鏡（TEM）和WB鑒定了相應的外泌體。qPCR顯示HCCLM3和SMMC-7721細胞系衍生的外泌體circUHRF1的表達第 一高。為了研究circUHRF1是否可以由HCC細胞通過外泌體遞送到HCC患者血漿中。進行了qPCR鑒定了血漿外泌體circUHRF1，結果顯示HCC患者血漿外泌體circUHRF1水平較高，腫 瘤切除后血漿外泌體circUHRF1水平降低，腫 瘤復發患者血漿外泌體circUHRF1水平升高，說明血漿外泌體circUHRF1主要由HCC細胞產生。此外，外泌體circUHRF1水平的升高常伴隨著NK細胞比例降低。上述數據表明，外泌體circUHRF1可能是決定NK細胞相關免疫逃避的關鍵分子。

（ 3）肝ai細胞通過外泌體circUHRF1抑 制NK細胞功能
為確定HCC細胞衍生的外泌體circUHRF1是否可以誘導NK細胞功能異常，作者將NK細胞與HCCLM3和SMMC-7721細胞進行共培養。結果表明，與SMMC-7721和HCCLM3細胞共培養的NK細胞中分泌IFN-γ和TNF-α受到抑 制且circUHRF1表達的顯 著增強，但這兩種作用可以被外泌體抑 制劑GW4869所阻斷。為進一步研究HCC細胞是通過外泌體circUHRF1介導NK細胞功能障礙，作者利用shRNA敲低了SMMC-7721和HCCLM3 細胞中circUHRF1的表達，qPCR顯示在敲低circUHRF1的肝ai細胞中，外泌體circUHRF1的表達顯 著降低，從而改善NK細胞中IFN-γ和TNF-α的分泌受損。這些結果說明，HCC通過外泌體circUHRF1抑 制NK細胞功能。