影響HPLC保留時間漂移因素有哪些？如何解決？

　　如若發生保留時間漂移，首先需要考慮流動相是否已使色譜柱達到充分的平衡。一般情況下，流動相平衡色譜柱需要10-20個柱體積；但如果流動相中有使用弱酸、弱堿、緩沖鹽和離子對試劑，則需要更長的時間來平衡色譜柱。還有可能是流動相受到污染（水是最容易受到污染的流動相成分），存在于流動相中的小分子污染物會在色譜柱中慢慢富集，從而也會造成保留時間的漂移。

　　不同填料、不同鍵合相的色譜柱，其固定相的穩定性也有所區別。如：普通硅膠填料色譜柱的耐受pH范圍為2-8；聚合物基質色譜柱耐受pH范圍在1-14；有機無機雜化硅膠填料的耐受pH范圍能達到1-12.5。即使在推薦的pH范圍內使用色譜柱，隨著進樣次數的增加，使用時間的延長，也會造成鍵合相的水解脫落。水解速度與所使用的流動相類型和配體有關。相比于單官能團配體，雙官能團配體和三官能團配體的鍵合相更加穩定；長鏈鍵合相比短鏈鍵合相要穩定；烷基鍵合相比氰基鍵合相更加穩定。

　　色譜柱也是分析試驗中的耗材，所以在使用過程中需要按照說明書進行相關維護。當保留時間漂移嚴重時，很有可能是色譜柱壽命已到，需要及時進行更換。

　　在分析試驗中，液相色譜柱不但會吸附待測組分，同時也會對流動相攜帶的其他物質產生吸附。造成色譜柱污染的來源可能是：流動相試劑瓶、流動相本身、儀器連接管路、進樣器、泵和密封墊，以及樣品本身所攜帶的雜質。樣品基質中如果含有保留性很強的污染物，就可能是待測組分保留時間產生漂移的根源。如：環境水樣中的腐殖酸、血清中的蛋白和脂類化合物以及配藥中的賦形劑等。這些樣品中的污染物會在色譜柱的前端進行富集，導致保留時間漂移，同時也會伴有柱壓的升高。

　　可以通過SPE、QuEChERS等前處理方法對樣品進行凈化，去除樣品中的雜質和污染物。此外，可以通過使用保護柱來避免污染物與分析柱的直接接觸，或者通過反沖色譜柱來除去污染物（月旭科技絕大多數色譜柱都可以進行反沖）。

　　流動相組成成分的變化也會引起保留時間的漂移，如流動相中易揮發組分的流失、變質等。

　　于進行過封尾處理的反相色譜填料，當使用接近100%的水為流動相時，會發生分離突然喪失、待測組分保留減弱，甚至不保留的現象，此種情況就是疏水坍塌。原因是100%的水相不能浸潤反相色譜填料，挽救的辦法是先用含大量有機相的流動相浸潤色譜柱，再用分析流動相進行平衡。色譜柱長期儲存也會發生此種現象。使用嵌有極性基團的反相柱（如Ultimate polar-RP）或者未進行封尾處理的色譜柱可以有效避免發生坍塌現象。