一、高效液相色譜儀檢測黃曲霉毒素實驗材料:
1.1免疫親和柱:黃曲霉毒素總量免疫親和柱
1.2色譜柱:Venusil MP C18 (4.6*150mm, 5μm),
二、高效液相色譜儀檢測黃曲霉毒素實驗方法:
1.1 混合對照品溶液的制備 精密量取黃曲霉毒素混合標準品(黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2標示濃度分別為1. 0μg/mL、0.3μg/mL、1.0μg/mL、
0.3μg/mL)1mL,置10mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,作為儲備液。精密量取儲備液1mL,置50mL量瓶中,用70%甲醇溶液稀釋至刻度,即 得。
1.2供試品溶液的制備 取供試品粉末約10g,精密稱定,加入氯化鈉2g,精密加入70%甲醇溶液100mL,超聲處理20分鐘,離心5分鐘(離心速度8000
轉/分),精密量 取上清液10mL,置50mL量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,精密量取25mL,通過免疫親和柱,流速每分鐘2-3mL,用水5mL淋洗,
洗液棄去,使空 氣進入柱子,再用甲醇1.4mL分2次洗脫,收集洗脫液,用水定容至2mL,即得。
1.3測定法 分別精密吸取上述混合對照品溶液20μl、供試品溶液20μl,注入液相色譜儀,測定峰面積,從標準曲線上讀出供試品中相當于黃曲霉毒素
B1、B2、G1、G2的量,計算,即得。
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