斑馬魚——CRISPR高通量基因功能研究新平臺

　　近日，來自美國NIH的研究人員進行了一項研究，他們利用CRISPR-CAS9技術靶向斑馬魚特定DNA序列進行基因功能探索和人類治病基因的發現研究，相關研究成果在線發表在國際學術期刊genome research。

　　在這項研究中，研究人員發現利用基因編輯技術CRISPR-CAS9進行斑馬魚基因靶向識別以及插入刪除特定基因的效率可以達到其他技術的6倍。同時，利用CRISPR-CAS9技術還能夠在同一時間對多個基因進行靶向突變，為研究基因功能提供了極大便利。

　　研究人員指出，斑馬魚是一種常用的實驗動物模型，并且人類已經完成對斑馬魚的基因測序，由于斑馬魚有70%的基因與人類同源且斑馬魚的繁殖快，產量大，并且飼養更加經濟，因此相比于其他模式動物，斑馬魚更適合進行高通量篩選。

　　在該項研究中，研究人員為探究利用斑馬魚進行高通量基因編輯的可行性，他們利用CRISPR－CAS9技術對83個斑馬魚基因的162個位點進行了基因編輯，其中有大約50%的基因與人類耳聾相關基因類似。最終通過這種方法，共獲得82個基因的突變。隨后研究人員又利用熒光PCR和高通量DNA測序的方法對斑馬魚的胚胎進行了篩選，他們發現有大約28%的突變能夠遺傳給下一代。

　　這項研究表明，利用CRISPR－CAS9進行斑馬魚基因的編輯有可能實現對斑馬魚基因組所有基因進行突變，隨后進行大規模表型篩選，這對于基因功能的探索以及人類致病基因的發現都具有重要意義。