日本國立遺傳學研究所于2016年7月6日宣布,他們成功研發新方法可以在3小時內檢驗各種人體組織切片內染色體端粒的長短。
真核細胞線狀染色體末端被一種名為"端粒(Telomere)"的DNA-蛋白質復合體所保護,在部分癌細胞中,端粒的長度會變得極短,因此端粒的長度一直以來被看做是癌癥診斷的一項生物指標。
在過往的實驗中,專家普遍采用"FISH法"來測量端粒的長短,這種方法是利用熒光色素標識的核酸探針,使目標堿基順序可視化。由于這種方法需要加熱和使用變性劑來分離雙鏈DNA,這項操作存在破壞細胞內部結構的風險,對組織切片中特定細胞進行標識所需要進行的免疫染色很難與其并用。此外,使用FISH法進行端粒檢驗需要耗費1天以上的時間,當樣本較多時往往會消耗大量的人力及時間。
小組成員在過往的研究中,成功開發出了能夠和端粒序列進行特殊結合的熒光標識劑"PI聚酰胺",并通過進行大量合成,提高針對端粒序列的特異性,開發出改良型PI聚酰胺。PI聚酰胺不需要進行加熱和變性劑處理,僅僅是和培養細胞的樣本進行混合就能夠標識出端粒,將其與抗體混合還能夠進行免疫染色。
研究小組使用改良型PI聚酰胺成功對小鼠及人體的冷凍組織切片中的端粒進行了標識。此外,為了調查生殖細胞染色體的端粒長短,研究人員還嘗試同時使用PI聚酰胺和原始生殖細胞標志物對小鼠睪丸進行染色,成功觀察到原始生殖細胞端粒與體細胞端粒的區別。
研究人員還通過與腫瘤標記物并用,對食道癌、非癌癥組織切片的端粒進行染色,測量PI聚酰胺的熒光強度,確認了腫瘤標記物陽性細胞中端粒的長度會縮短。
專家表示,本次的研究成果不僅可以用于基礎研究以及臨床試驗,還能夠在保持細胞內空間信息的前提下標識端粒,如果與超分辨率熒光顯微技術結合使用,在衰老以及癌癥的相關研究中會發揮極大作用。
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