無癥狀頸動脈狹窄精準診療有了全新策略

近日，MedComm發表了首都醫科大學宣武醫院神經外科徐新/焦力群教授團隊在動脈粥樣硬化研究領域取得重要突破。該研究從無癥狀頸動脈狹窄（aCAS）患者斑塊組織中分離鑒定出小細胞外囊泡（psEVs），揭示其通過miR-497-5p/UCP2/ROS通路介導內皮炎癥和易損斑塊形成的關鍵機制。同時，研究團隊還成功篩選出5個血漿來源sEV miRNA作為預測斑塊易損性的新型無創診斷標志物，為aCAS的精準診療提供了全新策略。

缺乏可靠的無創診斷標志物

無癥狀頸動脈狹窄（aCAS）是缺血性卒中的重要危險因素之一。然而，當前指南對血運重建的獲益仍存爭議。越來越多的證據表明，斑塊易損性（如纖維帽破裂或斑塊內出血）而非單純管腔狹窄程度是卒中風險的核心決定因素，但其分子機制尚不明確，且缺乏可靠的無創診斷標志物。

小細胞外囊泡（sEVs）是重要的細胞間通訊載體，其中組織來源亞群（Ti-sEVs）相較于體液或體外細胞培養來源sEVs更能精準反映疾病特異性病理過程。但斑塊來源sEVs（psEVs）在易損斑塊形成中的作用及可能機制尚不明確。

鑒于此，研究團隊從aCAS患者穩定或易損頸動脈斑塊中分離提取了psEVs，通過體內、體外實驗探索了其在動脈粥樣硬化發病機制中的生物學功能和關鍵機制。此外，研究團隊還通過測序分析了psEVs中的miRNA表達譜，隨后通過多隊列臨床研究設計探索了血漿來源的sEV miRNA作為斑塊易損性診斷生物學標志物的潛力。

首先，研究人員從aCAS患者穩定或易損斑塊（纖維帽破裂或斑塊內出血）中分離提取psEVs并進行相關表型和純度鑒定。隨后，采用多隊列研究設計，對穩定/易損斑塊psEVs進行miRNA表達譜測序，篩選差異表達miRNA，并探索血漿sEV miRNA預測斑塊易損性的效能。最后，利用體外內皮細胞模型和ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化模型，結合雙熒光素酶報告實驗等技術，闡明psEVs介導內皮炎癥和易損斑塊形成的分子通路。

驅動斑塊易損性的重要介質被揭示

研究結果顯示，psEVs可被內皮細胞高效攝取，顯著誘導NLRP3炎癥小體激活和細胞焦亡，導致內皮通透性增加和單核細胞黏附增強，尤以易損斑塊psEVs表現出更強的促炎作用。在ApoE-/-小鼠模型中，外源性psEVs可靶向聚集于斑塊區域，特別是易損斑塊psEVs顯著加速小鼠主動脈易損斑塊形成。

通過miRNA測序分析，研究人員發現了21個差異表達miRNA可區分穩定與易損斑塊（纖維帽破裂或斑塊內出血）來源psEVs。此外，41個差異表達miRNA可進一步區分易損斑塊的兩種亞型。

其中，血漿sEV miR-497-5p、miR-152-3p、miR-204-5p可有效區分穩定斑塊與易損斑塊。血漿sEV miR-23a-3p和miR-143-5p能進一步區分纖維帽破裂與斑塊內出血。并且，上述標志物在獨立外部驗證隊列及高通量液體活檢平臺（HNCIB）中驗證有效，穩定性好。

此外，鑒于sEV主要通過傳遞miRNA發揮生物學作用，研究團隊選擇了表達上調的miR-497-5p。進一步機制研究發現，易損斑塊psEVs通過遞送miR-497-5p靶向抑制線粒體抗氧化蛋白UCP2，激活ROS/TXNIP/NLRP3通路，引發炎癥級聯反應并加劇內皮損傷，最終導致易損斑塊形成。

焦力群表示，該研究證實頸動脈斑塊組織來源psEVs是驅動斑塊易損性的重要介質，提出其釋放到循環中的5種miRNAs（miR-497-5p、miR-152-3p、miR-204-5p、miR-23a-3p和miR-143-5p）可作為高敏、無創生物學標志物，用于aCAS患者高危斑塊風險分層。此外，miR-497-5p/UCP2通路的發現為動脈粥樣硬化的防治提供潛在干預靶點。

相關論文信息： https://doi.org/10.1002/mco2.70220