普通生物顯微鏡的使用方法及其注意事項

一、顯微鏡的使用方法

 ㈠準備工作：首先將顯微鏡的工作臺擦干凈，然后將要觀察的標本和各種器具準備好。

 ㈡顯微鏡的使用

⒈取用：將顯微鏡從鏡箱取出，取出時一手握鏡臂，一手托底座將其輕放在離工作臺邊緣8－10厘米處，偏左的位置。

⒉低倍鏡的使用⑴對光：對光前，先安上合適的目鏡（一般采用10×目鏡），將10×、40×、100×物鏡按照順時針安在物鏡轉換器上，逆時針轉動轉換器使10×物鏡對準載物臺中央的通光孔。從目鏡中觀察，同時調節反光鏡或接通電源，直至視場明亮、均勻為止。

使用雙目顯微鏡對雙目鏡寬度要進行調節，用推或拉的方法調節兩目鏡之間的距離，直到在兩個目鏡上雙眼同時觀察時，兩個圖形的視場正好完全重合，此時鏡筒刻度盤上所示的數字，就是觀察者兩眼瞳孔之間的距離。

根據物鏡的放大倍數調節聚光鏡的高度，使用油鏡時由于放大倍數大，鏡像亮度小，需要較強的照明，需要將聚光鏡升至zui高處。 

調節可變光闌（光圈）使聚光鏡的鏡口率與物鏡的鏡口率一致，才能充分發揮舞靜的分辨率，方法為：將顯微鏡調整到工作狀態后，從目鏡筒中拔出目鏡，一邊觀察（向拔出目鏡的目鏡筒里看），一邊縮小光闌，這時可看到縮小的光闌被物鏡成的像，然后逐漸調大光闌，當光闌像的邊緣與物鏡通光孔黑圈的邊緣一致時停止，這時的聚光鏡鏡口率與物鏡鏡口率就一致了。如顯微鏡可變光闌圓框上刻有表示口徑的標尺，可調至物鏡鏡口率的80％，即物鏡鏡口率為0.65，則可變光闌的標尺調至0.65×80％＝0.52即可。

⑵觀察：將標本放置在載物臺上，使標本對準通光孔正中，下降鏡筒或升高載物臺，并從側面觀察，使物鏡下端和標本逐漸接近，但不能碰到蓋玻片。從目鏡觀察，用粗準焦螺旋慢慢升起鏡筒和下降載物臺直到看到標本為至，再調節細準焦螺旋至物像清晰。

⒊高倍鏡的觀察

在低倍鏡下，找到要進一步觀察的部位，移至視野中心，再上升聚光鏡、逆時針轉動物鏡轉換器換上高倍鏡。合格的顯微鏡操作距離是由低倍鏡轉換到高倍鏡時剛好合用的，一般稍為調節一下細準焦螺旋即可看到清晰的物像。

⒋油鏡的觀察

在高倍鏡下看到標本后，把需要進一步放大的部位移至視野中心。上升鏡筒或下降載物臺約1.5厘米。將物鏡轉離光軸，在蓋玻片所要觀察的部位上滴一滴香柏油，把光闌升至zui大。換上油鏡，小心調節粗準焦螺旋，使油鏡慢慢下降或慢慢上升載物臺，從側面觀察油鏡下端與標本之間的距離，當油鏡的下端開始觸及油滴時即可停止。從目鏡觀察，調節細準焦螺旋，直至看清標本物像。

 觀察完畢，上升鏡筒或下降載物臺，將油鏡轉離光軸，用干的擦鏡紙輕輕地吸掉油鏡和蓋玻片上的油，再用浸濕二甲苯的擦鏡紙擦拭兩三次，zui后用干凈的擦鏡紙再擦拭兩三次。

 ㈢觀察后的處理工作

清潔：顯微鏡上的污物（殘物或灰塵），用擦鏡紙擦干凈，若擦不干凈可蘸少許二甲苯進行擦拭。

顯微鏡各部分的放置：擦完后，把物鏡轉離光軸，把反光鏡轉到與載物臺垂直的方向，以減少灰塵粘落上面，而后罩上鏡套，小心的放回鏡箱內，保存備用。

二、使用顯微鏡時應注意的事項

⒈取放時動作一定要輕，切忌震動和暴力，否則會造成光軸偏斜而影響觀察，而且光學玻璃也容易損壞。

⒉由于物鏡的螺絲口容易損傷，安裝物鏡時要特別小心，即先向左方倒轉一小段，凹凸雙方吻合后再向右方旋轉，不要轉的太緊，輕輕捻到頭，再稍緊即可。

⒊鏡檢標本應嚴格按照操作程序進行，觀察時要從低倍鏡開始，看清標本后再轉用高倍鏡、油鏡。

⒋使用油鏡時一定要在蓋玻片上滴油后才能使用。油鏡使用完后，應立即將鏡頭、蓋玻片上的油擦干凈，否則干后不易擦去，以致損傷鏡頭和標本。但應注意二甲苯用量不可過多，否則，物鏡中的樹膠溶解，透鏡歪斜甚至脫落，蓋玻片移動甚至連同標本一起融掉。

⒌使用時不可用手摸光學玻璃部分，如需擦拭應嚴格按照光學部件擦拭辦法。 

⒍使用的蓋玻片和載玻片不能過厚或過薄。標準的蓋玻片為0.17±0.02毫米，載玻片為1.1±0.04毫米。過厚或過薄將會影響顯微鏡成像及觀察。

三、生物顯微鏡的擦拭和保養

㈠擦拭 

⒈光學部分的擦拭順序：吸耳球吹――毛筆、刷子和羽毛輕刷――擦鏡紙輕擦——擦鏡紙蘸二甲苯輕擦。 鏡頭表面發霉和發霧可用擦鏡紙蘸少量酒精乙mi混合液（3：7）輕擦。內表面發霉和發霧，一般無法清除，所以嚴防發生。 

⒉機械部分的擦拭用干凈的軟布擦拭，或用擦鏡紙蘸二甲苯輕擦，不得用酒精和乙mi，因為這些試劑會侵蝕油漆，容易把油漆擦掉。

㈡保養

防潮、防塵、防腐蝕、放熱