⑥7.5% NaHCO3溶液
稱取分析純NaHCO3 7.5g，溶于100ml超純水或四蒸水中，過濾除菌，分裝小瓶（4-5ml/瓶），蓋緊瓶塞，4℃保存。
⑦HEPES溶液（1mol/L）
稱取23.83g HEPES（N-2-Hydroxyethylpiperazine-N，-2-ethanesulfonic
acid，N-2-羥乙基哌嗪- N，-2-乙基磺酸，MW
238.3）溶于100ml超純水或四蒸水中，過濾除菌，分裝小瓶（4-5ml/瓶），4℃保存。
⑧8-氮鳥嘌呤貯存液（100×）
稱取200mg 8-氮鳥嘌呤（8-azaguanine，MW 152.1），加入4mol/L NaOH 1ml，待其溶解后，加入超純水或四蒸水99ml，過濾除菌；分裝小瓶，-20℃凍存。使用時按1%濃度加入到培養液中（即終濃度為20ug/ml）。
⑨50% PEG
稱取PEG 1000 或4000
20-50g于三角瓶中，蓋緊，60-80℃水浴融化，0.6ml分裝于青霉素小瓶中，蓋緊，8磅高壓蒸汽15分鐘，-20℃存放備用。臨用前加熱融化，加等量不完全培養基，用少許7.5%
NaHCO3調PH至8.0，或購買Sigma或Gibco公司現成產品。
（2）髓瘤細胞的準備
融合前骨髓瘤細胞維持的方式，對成功地得到雜交瘤是最為重要的。目標是使細胞處于對數生長的時間盡可能長，融合前肯定不能少于1周。凍存的細胞在復蘇后要2周時間才能處于適合于融合的狀態，長過了的骨髓瘤細胞至少幾天才可能恢復。在實驗室中處于對數生長的骨髓瘤細胞維持在含10%小牛血清的培養基中，方法是用6個裝5ml培養基的培養瓶，接種10倍系列稀釋的骨髓瘤細胞。1周后到細胞相當密而又未長過的一瓶重新移植。典型的倍增時間為14-16小時。
骨髓瘤細胞懸液的制備方法如下
①于融合前48-36小時，將骨髓細胞擴大培養（一般按一塊96孔板的融合試驗約需2-3瓶100ml培養瓶培養的細胞進行準備）。
②融合當天，用彎頭滴管將細胞從瓶壁瘤輕輕吹下，收集于50ml離心管或融合管內。
③1000r/min離心5-10分鐘，棄去上清。
④加入30ml不完全培養基，同法離心洗滌一次。然后將細胞重懸浮于10ml不完全培養基，混勻。
⑤取骨髓瘤細胞懸液，加0.4%臺盼藍染液作活細胞計數后備用。細胞計數時，取細胞懸液0.1ml加入0.9ml臺盼藍染液中，混勻，用血球計數板計數。計算細胞數目的公式為：每毫升細胞數=4個大方格細胞數×105/4；或每毫升細胞數=5個中方格細胞數×106/2
（3）脾淋巴細胞的準備
取已經免疫的BALB/c小鼠，摘除眼球采血，并分離血清作為抗體檢測時的陽性對照血清。同時通過頸脫位致死小鼠，浸泡于75%酒精中5分鐘，于解剖臺板上固定后掀開左側腹部皮膚，可看到脾臟，換眼科剪鑷，在超凈臺中用無菌手術剪剪開腹膜，取出脾臟置于已盛有10ml不完全培養基的平皿中，輕輕洗滌，并細心剝去周圍結締組織。將脾臟移入另一盛有10ml不完全培養基的平皿中，用彎頭鑷子或裝在1ml注射器上的彎針頭輕輕擠壓脾臟（也可用注射器內芯擠壓脾臟），使脾細胞進入平皿中的不完全培養基。用吸管吹打數次，制成單細胞懸液。為了除去脾細胞懸液中的大團塊，可用200目銅網過濾。收獲脾細胞懸液，1000r/min離心5-10分鐘，用不完全培養基離心洗滌1-2次，然后將細胞重懸于10ml不完全培養基混勻，取上述懸液，加臺酚藍染液作活細胞計數后備用。通常每只小鼠可得1×108-2.5×108個脾細胞，每只大鼠脾臟可得5×108-10×108脾細胞。