果蠅的三點測交材料、原理和步驟

實驗六 果蠅的三點測交

一、實驗目的：

掌握三點測交的原理及方法；學習三點測交的數據統計處理及分析方法；了解繪制遺傳學圖的原理和方法。

二、實驗材料：

黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)品系：野生型果蠅（+++） 紅眼、長翅、直剛毛

三隱性果蠅（wmsn3） 白眼、小翅、焦剛毛

三、實驗原理：

連鎖交換定律：處在同一染色體上的兩個或兩個以上基因遺傳時，聯合在一起的頻率大于重新組合的頻率。重組類型的產生是由于配子形成過程中，同源染色體的非姊妹染色單體間發生了局部交換的結果。

三點測交：三點測交就是通過一次雜交和一次測交，同時確定三對等位基因（即三個基因位點）的排列順序和它們之間的遺傳距離，是基因定位的常用方法。主要過程是：用三雜合體和三隱性個體雜交，獲得三因子雜種（F1），再使F1與三隱性基因純合體測交，通過對測交后代表現型及其數目的分析，分別計算三個連鎖基因之間的交換值，從而確定這三個基因在同一染色體上的順序和距離。通過一次三點測驗可以同時確定三個連鎖基因的位置，即相當于進行三次兩點測驗，而且能在試驗中檢測到所發生的雙交換。

觀察到的雙交換頻率

兩個單交換頻率的乘積

如果兩個基因間的單交換并不影響鄰近兩個基因的單交換，那么預期的雙交換頻率應當等于兩個單交換頻率的乘積，但實際上觀察到的雙頰還值往往低于預期值，因為每一次發生單交換，它鄰近也發生一次交換的機會就減少一半，這叫干涉。一般用并發率表示干涉的大小。

四、實驗內容：

1、 選處女蠅：每組做正，反交各1瓶，正交選野生型為母本，三隱性雄蠅為父本。反交選三隱性雌蠅為母本，野生型為父本，將母本舊瓶中的果蠅全部麻醉處死，在8-12h內收集處女蠅5只，將處女蠅和5只雄蠅轉移到新的雜交瓶中，貼好標簽，于25℃培養；

2、 7d后，釋放雜交親本（一定要干凈）；

3、 再過4-5天，F1成蠅出現，在處死親本7天后，集中觀察記錄F1表型及性別。

4、 選取5對F1代果蠅，轉入一新培養瓶，于25℃培養，其余F1代果蠅處死；

5、 7d后，處死F1親本；

6、 再過5d，F2成蠅出現，開始觀察記錄，連續統計7d，觀察眼色，翅形及剛毛形態。正交只需統計雄性個體。要求每組至少統計250只果蠅。