果蠅單因子雜交實驗（圖）

根據孟德爾的顆粒遺傳學理論，基因是一個獨立的結構與功能單位．在雜合狀態時不發生混淆，完整地從一代傳遞到下一代．由該基因的顯隱性決定其在下一代的性狀表現。單因子雜交是指一對等位基因間的雜交。孟德爾第一定律指出，一對雜合狀態的等位基因保持相對的獨立性，其自交后代中表型分離比為 3 ： l 。

本實驗將觀察果蠅單因子雜交后代的表型及其分離情況。

一、實驗目的

1、 通過實驗深刻理解孟德爾分離定律。

2、 掌握果蠅的雜交技術。

二、實驗材料

黑腹果蠅 ( Drosophila melanogaster ) 。

野生型：長翅果蠅 (+/+)

突變型：殘翅果蠅 (vg ／ vg)

野生型果蠅的雙翅為長翅 (+/+) ，翅長超過尾部。殘翅果蝸 (vg ／ vg) 的雙翅幾乎沒有，只留少量殘痕，無飛翔能力。

三、儀器設備

立體解剖鏡，恒溫培養箱，天平，培養瓶及麻醉瓶，毛筆及白瓷板。

四、藥品試劑

乙醚，玉米粉，瓊脂，紅糖，酵母粉，丙酸。

五、實驗步驟

1 、交配方式：用純系殘翅果蠅 ( 雌 ) 與長翅果蠅 ( 雄 ) 交配，此為正交實驗；反交實驗以長翅果蝸為母本、殘翅果蠅為父本，由此得 F1 代。 F2 代雌雄個體相互交配， F2 代出現性狀分離，如下圖所示。

2 、選野生型和殘翅果蠅為親本。雌蠅一定要選處女蝸，可在實驗前 2-3 天陸續收集，雌雄個體分開培養．數目多少根據需要而定。

將雌雄果蠅放在一起培養，雌蠅的生殖器中有貯精囊，可保留交配所得的大量精子，雌蠅一次交配所得的精子，足夠它多次排出的卵受精，因此在做雜交試驗時，雌蠅必須選用處女蠅（沒有交配過的雌蠅）。那么如何才能得到處女蠅呢？一般來說，剛羽化出來的果蠅在 12 小時之內是不進行交配的，所以在這段時間內選出的雌蠅即為處女蠅。為了保險起見，可以在羽化后的 8 小時內挑選。因此，在雜交實驗開始的一段時間內，各實驗小組要根據自己的實驗設計，精心挑選處女蠅。為了操作方便，可以在每天晚上 22 ： 00 ～ 23 ： 00 將培養瓶內的成蠅殺死，次日早晨 8 ： 00 ～ 9 ： 00 對新羽化出的果蠅進行挑選。

3、首先把殘翅處女蠅倒出麻醉，挑 5 只移到水平放置的雜交瓶中，再把長翅倒出麻醉，挑選 5 只雄蠅，移到上述雜文瓶中。等雜交親本在雜交瓶中全部蘇醒后，將雜交瓶直立，并移入 25 ℃ 溫箱中培養。同時，按上述操作進行反交實驗接種培養。注意按下述方式貼好標簽：

4、7 天后，釋放雜交親本。

5 、再過 4-5 天， Fl 成蠅開始出現，觀察 F1 翅膀 ( 表型 ) ，注意顯、隱性關系，連續檢查 2-3 天，并計數統計，或在釋放親本 7 天后集中觀察。

6 、選取正、反交各 5 對 F1 雌雄果蠅，分別移入一新培養瓶 ( 這里不需用選取處女蠅 ) ，置 25 ℃ 溫箱小培養。當看到培養瓶內有蛹出現時，及時將親本處死，以防發生回交。

7 、 7 天后，釋放 Fl 親本。再過 4-5 天， F 2 代成蠅出現后，進行觀察統計，可連續統計 7-8 天，觀測數目在 200 只以上。被統計過的果蠅倒入水槽沖掉。

注意：無論是對 F 1 還是對 F 2 進行統計，都要及時進行，避免陸續羽化出的果蠅在培養瓶內交尾后將卵產在培養基內。因此要求實驗者不斷進行觀察，只要有新羽化出的果蠅，就要及時取出，并進行統計和觀察。