實驗方法原理 在一般情況下,通過鹽酸水解后使 DNA 殘基分解堿基,然后從碳鍵處打斷糖苷鍵而游離出醛基,再與無色復紅液(Schiff)進行反應,形成紫紅色的復合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚爾根染色法)。
實驗材料 石蠟組織切片
試劑、試劑盒 Schiff 試劑染色液濃鹽酸蒸餾水二甲苯無水乙醇中性樹膠
儀器、耗材 滴管
實驗步驟
Schiff 試劑染色液(見糖原部分)。
5mol/L 鹽酸液:濃鹽酸(相對密度 1.19)42 ml,蒸餾水加至 100 ml。
1. 石蠟組織切片,常規脫蠟至水。
2. 蒸餾水洗 2 min,5mol/L 鹽酸液中水解 30 min。
3. 蒸餾水洗 3 次,浸入 Schiff 染色液中 30 min。
4. 直接浸入自來水中 5 min。
5. 根據需要進行對比染色。
6. 無水乙醇脫水,二甲苯透明和中性樹膠封固。
注意事項
1. Schiff 試劑每次使用時,要注意吸管淸潔,試劑用后應及時存放冰箱。
2. 對比染色劑可選用亮綠或苯胺藍,根據需要進行淡染色。
其他
結果:DNA 呈紫紅色,其他是對比染色。
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