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  • 發布時間:2018-04-02 17:15 原文鏈接: 毛細管區帶電泳

    樣品在電解液中泳動,根據物質的荷/質比差異來進行分離,比值愈大,跑得愈快。 

    毛細管帶電泳毛細管帶電泳


    毛細管區帶電泳的進樣方式有三種,分別為壓力進樣、電動進樣、濃縮進樣,如下圖: 

    方式方式

     

    常用毛細管規格如圖示,毛細管分非涂層毛細管(裸管)和內壁涂層毛細管(涂層管)兩類。 

    分類分類

    非涂層毛細管-電滲流的概念(電滲流是CE中最大的驅動力來源之一):
    電滲流是毛細管內壁表面電荷所引起的管內液體的整體流動,來源于外加電場對管壁溶液雙電層的作用。
    電滲流的特點: 

    特點特點



    純電泳狀態: 

    狀態狀態



    電滲流+電泳: 

    電滲流電滲流

     
    電滲流的正面作用:
    1.增加分離速度;
    2.使得正、負電荷物質同時分離。

    電滲流的負面作用:
    1.減少分離時間和分離有效距離;
    2.電滲流的波動極大的影響了遷移時間的重復性。

    影響電滲流的因素:
    1.PH值: PH值越高,電滲流越大。 

    ph值ph值

     

    2.離子強度:離子強度越高,電滲流越小。
    3.緩沖溶液添加劑:離子型表面活性劑、有機溶劑、環糊精 

    控制電滲流的三個重要手段:
    1.采用涂層毛細管,消除電滲流的影響;
    2.改變pH,從而調整電滲流的大小。pH<3時電滲流很低;當pH>10以后,電滲流基本不增加;
    3.添加劑:有機溶劑可以降低電滲流的大小,從而增加分離的有效距離;表面活性劑可以徹底改變電滲流的方向和大小,主要是在陰離子分析時使用。

    CZE中緩沖溶液的影響和選擇:
    1.在所選的pH范圍內有較強緩沖能力;
    2.在檢測波長處有低的紫外吸收;
    3.小的淌度(即大體積、低電荷離子)以降低所產生的電流。
    那些被稱為生物“優良緩沖液”的,如Tris, borate, CAPS等特別有用,因為這些緩沖溶液中的離子一般較大,能夠在較高濃度下使用而不會產生大的電流,但一個潛在的缺點是這些大的緩沖離子有強的紫外吸收。

    常用的CE緩沖體系:
    1.磷酸鈉體系:寬緩沖范圍
    2.硼酸鈉體系:高pH范圍
    3.Tris-HCl體系:低pH范圍
    4.醋酸-醋酸銨體系:CE/MS常用體系


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