樣品在電解液中泳動,根據物質的荷/質比差異來進行分離,比值愈大,跑得愈快。
毛細管帶電泳
毛細管區帶電泳的進樣方式有三種,分別為壓力進樣、電動進樣、濃縮進樣,如下圖:
方式
常用毛細管規格如圖示,毛細管分非涂層毛細管(裸管)和內壁涂層毛細管(涂層管)兩類。
分類
非涂層毛細管-電滲流的概念(電滲流是CE中最大的驅動力來源之一):
電滲流是毛細管內壁表面電荷所引起的管內液體的整體流動,來源于外加電場對管壁溶液雙電層的作用。
電滲流的特點:
特點
純電泳狀態:
狀態
電滲流+電泳:
電滲流
電滲流的正面作用:
1.增加分離速度;
2.使得正、負電荷物質同時分離。
電滲流的負面作用:
1.減少分離時間和分離有效距離;
2.電滲流的波動極大的影響了遷移時間的重復性。
影響電滲流的因素:
1.PH值: PH值越高,電滲流越大。
ph值
2.離子強度:離子強度越高,電滲流越小。
3.緩沖溶液添加劑:離子型表面活性劑、有機溶劑、環糊精
控制電滲流的三個重要手段:
1.采用涂層毛細管,消除電滲流的影響;
2.改變pH,從而調整電滲流的大小。pH<3時電滲流很低;當pH>10以后,電滲流基本不增加;
3.添加劑:有機溶劑可以降低電滲流的大小,從而增加分離的有效距離;表面活性劑可以徹底改變電滲流的方向和大小,主要是在陰離子分析時使用。
CZE中緩沖溶液的影響和選擇:
1.在所選的pH范圍內有較強緩沖能力;
2.在檢測波長處有低的紫外吸收;
3.小的淌度(即大體積、低電荷離子)以降低所產生的電流。
那些被稱為生物“優良緩沖液”的,如Tris, borate, CAPS等特別有用,因為這些緩沖溶液中的離子一般較大,能夠在較高濃度下使用而不會產生大的電流,但一個潛在的缺點是這些大的緩沖離子有強的紫外吸收。
常用的CE緩沖體系:
1.磷酸鈉體系:寬緩沖范圍
2.硼酸鈉體系:高pH范圍
3.Tris-HCl體系:低pH范圍
4.醋酸-醋酸銨體系:CE/MS常用體系
6月5日,11:00a.m. 美國中部夏令時間馬薩諸塞州弗雷明漢——在ASMS2023上,生命科學分析技術制造商SCIEX推出了Intabio? ZT系統,這是一個在單一平臺上結合......
6月5日,11:00a.m. 美國中部夏令時間馬薩諸塞州弗雷明漢——在ASMS2023上,生命科學分析技術制造商SCIEX推出了Intabio? ZT系統,這是一個在單一平臺上結合......
毛細管電泳具備如下優點:(1)高效塔板數目在105-106片/m間,當采用CGE時毛細管電泳色譜圖,塔板數目可達107片/m以上;(2)快速一般在十幾分鐘內完成分離;(3)微量進樣所需的樣品體積為nL......
璃毛細管粘度計種類很多,國外大都以設計者的名字加以命名。它們構造和使用方法均大同小異。下面介紹較為常見的兩種:奧斯特瓦爾德粘度計奧斯特瓦爾德結構如右所示,此粘度計本身為一U型管,一側由管3和兩個測定泡......
毛細管電泳的缺點是:(1)由于進樣量少,因而制備能力差;(2)由于毛細管直徑小,使光路太短,用一些檢測方法(如紫外吸收光譜法)時,靈敏度較低;(3)電滲會因樣品組成而變化,進而影響分離重現性。......
毛細管柱又叫空心柱,分為涂壁、多孔層知和涂載體空心柱。涂壁空心柱是將固定相均勻地涂在內徑0.1~0.5mm的毛細管內壁而成,毛細管材料可以是不銹鋼、玻璃或石英道。毛細管色譜柱滲透性好,傳質阻力小,而柱......
在毛細管中實現電泳分離的優點:1、分析速度快、分離效率高、速度快和靈敏度高,柱效可高達數十萬塔板/米、適用于帶電樣品的分離等。2、毛細管電泳具有樣品消耗少、實驗試劑成本低等優點。3、操作簡單、適用面廣......
毛細管區帶電泳是芯片毛細管電泳分離蛋白質的一種最基本的分離模式。它基于不同的蛋白質分子在電場中的遷移速率不同而實現分離,是一種簡單、快速的分離方法。采用區帶電泳分離模式已成功地分離了多種蛋白質樣品。C......
1.毛細管類型--涂層還是非涂層?2.毛細管長度--長毛細管還是短毛細管?3.緩沖液體系--種類和pH值可先用磷酸緩沖體系為搜尋基礎,初步確定(最佳)pH范圍后,再進一步細選出更好pH和緩沖試劑。磷酸......
樣品在電解液中泳動,根據物質的荷/質比差異來進行分離,比值愈大,跑得愈快。 毛細管帶電泳毛細管區帶電泳的進樣方式有三種,分別為壓力進樣、電動進樣、濃縮進樣,如下圖: 方式 ......