氨基酸、蛋白質的性質

實驗概要

熟悉氨基酸主要的化學性質；了解蛋白質的基本結構和重要的化學性質；掌握鑒別氨基酸和蛋白質的方法。

主要試劑

1. 蛋白質溶液

2. 5%硫酸銅

3. 0.5%甘氨酸

4. 0.5%酪氨酸

5. 米隆試劑

6. 0.5%苯丙氨酸

7. 飽和硫酸銨

8. 5%堿性醋酸鉛

9. 1%硫酸銅

10. 0.5%苯酚

11. 5%甘氨酸等

主要設備

1. 常用儀器

2. 水浴鍋

實驗步驟

1. 鹽析試驗

取一支試管，加入蛋白質溶液20滴，再加入20滴飽和硫酸銨溶液，振蕩后析出蛋白質沉淀，溶液變混濁。取混濁液10滴于另一試管中，加入蒸餾水2mL，振蕩后觀察現象。

2. 醇對蛋白質的作用

取10滴蛋白質溶液于試管中，加入10滴95%乙醇，振蕩，靜置數分鐘 ，溶液混濁，取混濁液10滴滴于另一試管中，再加入蒸餾水1mL，振搖，觀察現象，與鹽析結果比較。

3. 蛋白質與重金屬鹽作用

取2支試管，各加入蛋白質溶液10滴，再在其中一支試管中加入5%堿式醋酸鉛溶液1滴，另一支試管中加入5%硫酸酮溶液1滴，立即產生沉淀(切勿加過量試劑，否則，沉淀又復溶解)。再用水稀釋，觀察沉淀是否溶解，與鹽析結果作比較。(本試驗可用5%甘氨酸溶液作對比試驗)

4. 蛋白質與生物堿試劑作用

取2支試管，各加入l0滴蛋白質溶液和2滴醋酸，一管加入飽和苦味酸2滴，另一管加入5%單寧酸2滴。觀察有無沉淀生成。

5. 茚三酮試驗

取2支試管，分別加4滴蛋白質溶液和4滴0.5%甘氨酸溶液，再分別加入3滴0.1%茚三酮溶液，混合后，放在沸水浴中加熱1-5分鐘，觀察并比較兩管的顯色時間及顏色情況。

6．二縮脲試驗

取2支試管，分別加入10滴蛋白質溶液、0.5%甘氨酸溶液，再各加入l0滴10%氫氧化鈉溶液，混合后，再分別加入1-2滴1%硫酸酮溶液(勿過量)振蕩后，觀察現象，比較結果。

7. 黃蛋白試驗

取一支試管，加入5滴蛋白質溶液及 2滴濃硝酸，出現白色沉淀或渾濁，然后加熱煮沸，觀察現象，反應液冷卻后再滴入10%氫氧化鈉溶液至反應液呈堿性，觀察顏色變化。

8. 米隆 (Millon)試驗

取4支試管，分別加入20滴蛋白質溶液，10滴0.5%苯酚溶液，10滴0.5%酪氨酸溶液和 10滴 0.5%苯丙氨酸溶液，再分別加入5-10滴米隆試劑，振搖，觀察現象。再將試管置于沸水浴中加熱 (不要煮沸，加熱勿過久，否則顏色消退)，再觀察現象。

9. 蛋白質的堿解

取1mL蛋白質溶液放在試管里，加入2mL30%NaOH溶液，把混合物煮沸2-3分鐘，此時析出沉淀，繼續沸騰時，沉淀又溶解，放出氨氣(可用紅色石蕊試紙放在試管口檢出之)。

向上面的熱溶液中加入lmL 1O%硝酸鉛溶液，再將混合物煮沸，起初生成的白色氫氧化鉛沉淀溶解在過量的堿液中。如果蛋白質與堿作用有硫脫下，則生成硫化鉛，結果清亮的液體逐漸變成棕色。當脫下的硫較多時，則析出暗棕色或黑色的硫化鉛沉淀。