3.2 常規檢驗方法:
3.2.1 增菌培養:快速檢驗法中的直接增菌法和濃縮增菌法相同,其中志賀氏菌的增菌時間可以為16-18小時。
3.2.2 平板分離:取上述經增菌的沙門氏菌、志賀氏菌培養液,用接種環化線接種改良SS選擇瓊脂平板,置37℃培養箱中培養24小時。(如使用其它選擇培養基時,請注意對宋內氏痢疾桿菌是否良好,還是不生長或生長很差)。
3.2..3 挑 選菌落接種雙糖管:每個平板挑取5個以上可疑腸道病原菌菌落,接種于雙糖鐵或三糖鐵試管培養基中(將克氏雙糖鐵干燥培養基加水煮沸溶解后分裝于塑帽試管 中,3ml,高壓蒸汽滅菌或水浴100℃15分鐘后放成高層斜面,凝固后即成)。置37℃培養箱中培養18-24小時。
附:沙門氏菌屬和志賀菌屬在改良SS選擇瓊脂平板上的菌落特征:
沙門氏菌屬,菌落呈無色透明或半透明或中間有黑心,直徑為1-3毫米(培養時間長時,有的菌落中心略呈微粉色,但與紅色的大腸菌菌落完全不同)。
志賀氏菌屬,菌落呈無色透明或半透明(宋氏痢疾桿菌的菌落中心有時略呈淺色),直徑1-3毫米。
3.2..4 生化反應及血清學檢驗:
沙門氏菌屬:在雙糖鐵或三糖鐵培養基上,底層變黃(分解葡萄糖產酸),產氣或不產氣(如傷寒沙門氏菌不產氣),一般產H2S;斜面呈紅色(不分解乳糖)。用沙門氏菌多價血清或單價抗血清進行凝集試驗,根據凝集與否判斷為陽性或陰性。
志賀氏菌屬:在雙糖鐵或三糖鐵培養基上,底層變黃(分解葡萄糖產酸),不產氣,無動力,不產H2S;斜面呈紅色(不分解乳糖)。用志賀氏菌多價血清或單價血清進行凝集試驗,根據凝集與否判斷為陽性或陰性。
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