水生所關于斑馬魚基因捕獲與插入突變的研究取得突破

　　脊椎動物后基因組時代的主要任務是解讀基因的功能，而基因捕獲和插入突變是揭示基因功能的重要手段。斑馬魚具有易于飼養、繁育周期短、產卵量大、體外受精與發育等優點，已成為發育和遺傳學研究的理想模式動物，但尚缺乏胚胎干細胞和基于胚胎干細胞的基因敲除技術。轉座子介導的基因捕獲和突變研究為大規模篩選斑馬魚突變體和闡明相關基因的功能提供了新途徑。

　　中國科學院水生生物研究所崔宗斌研究員學科組在深入研究“睡美人”(Sleeping Beauty)轉座子活性機制的基礎上，結合現有基因捕獲研究的最新成果，設計和構建出轉座子介導的基因和poly(A) 捕獲載體，并在斑馬魚胚胎發育過程中進行功能基因的捕獲研究，取得以下研究成果：1)系統檢測了基因和poly(A)捕獲載體中相關功能元件的活性;2)利用基因和poly(A)捕獲載體，在HeLa細胞中捕獲了大量基因，并有效干擾了這些基因的轉錄表達;3)利用羅非魚熱激蛋白70啟動子驅動轉座酶的表達，可實現捕獲載體在基因組中的再遷移，提高基因捕獲效率;4) Cre/LoxP系統可將轉座酶基因切除，以穩定突變體;5)利用基因和Poly(A)捕獲載體，成功地捕獲了斑馬魚基因，顯著干擾內源基因的轉錄表達，并獲得了一批突變體。

　　這些研究結果為探索斑馬魚基因功能提供了新技術平臺，亦為建立斑馬魚突變體庫奠定了堅實基礎。

　　上述研究得到科技部重點基礎研究計劃和國家自然科學基金的資助，主要由博士研究生宋桂麗等人完成，研究結果已在PLoS ONE和Journal of Genetics & Genomics上發表。