測定動物源性食品中22種磺胺類殘留量實驗

動物肝臟 腎 肌肉 水產品 牛奶

正丙醇 乙腈 正己烷

棕色離心瓶 棕色分液漏斗 旋轉蒸發儀 玻璃研缽 色譜柱

1.  前處理
 
（1）液-液提取凈化法
 
動物肝臟、腎、肌肉、水產品：稱取5 g試樣，精確至0.01 g。置于50 mL棕色離心瓶中，加入25 mL乙腈和無水硫酸鈉，于液體混勻器中快速混勻1min，均質后以3000 r/min離心5min，將乙腈層移入100 mL棕色分液漏斗中。離心后的沉淀物再加入25 mL乙腈搖勻，于3000 r/min離心5 min，合并乙腈提取液。
 
牛奶：稱取5 g試樣，精確至0.01g。置于50 mL棕色離心瓶中，加入25 mL乙腈，渦旋混合l min，超聲波提取30 s，3000 r/min離心10 min，過濾，待凈化。
 
提取液中加入25 mL乙腈飽和正己烷溶液，振搖5 min，將底層乙腈溶液移入100 mL棕色雞心瓶中，加入10 mL正丙醇，用旋轉蒸發儀于45 ℃水浴中減壓蒸發 至近干，氮氣流吹干。殘留物中加入1.00 mL乙腈-水溶液（1 + 1），超聲30 s溶解殘渣，將溶解液移入10 mL棕色離心管中，加0.5 mL乙腈飽和正己烷，以3000 r/min離心5 min，棄去正己烷溶液，將底層乙腈水溶液移入棕色樣品瓶中，供液相色譜測定。
 
（2）固相分散微波輔助萃取法
 
動物肝臟、腎、肌肉、水產品：稱取6 g C18填料置于玻璃研缽內，取2.0 g動物組織加至C18填料上用玻璃杵輕輕研磨30 s，使樣品與填料均勻混合；裝于50 mL聚四氟乙烯試管中，加入25 mL乙腈/水，旋渦振蕩1 min放入家用微波爐中微波福照30 s，離心5 min，將乙腈層移入100 mL棕色分液漏斗中。離心后的沉淀物再加入25 mL乙腈搖勻，超聲波提取30 s，于3000 r/min 離心5 min ，合并乙腈提取液。
 
牛奶：取2.0 g牛奶，置于玻璃研缽內，加入6 g硅藻土，另加入6 g C18填料，用玻璃杵輕輕研磨30 s，使樣品與填料均勻混合；裝于50 mL聚四氟乙烯試管中，加入25 mL乙腈-水溶液（1 + 1），旋渦振蕩1 min，放入家用微波爐中微波輻照30 s，離心5 min，將乙腈層移入100 mL棕色分液漏斗中。離心后的沉淀物再加入25 mL乙腈搖勻，超聲波提取30 s，于3000 r/min離心5 min，合并乙腈提取液。
 
提取液中加入25 mL乙腈飽和正己烷溶液，振搖5 min，將底層乙腈溶液移入100 mL棕色雞心瓶中，加入10 mL正丙醇，用旋轉蒸發儀于45 ℃水浴中減壓蒸發至近干，用氮氣流吹干。殘留物中加入1.0 mL乙腈-水溶液（1 + 1），超聲30 s溶解殘渣，將溶解液移入10 mL棕色離心管中，加0.5 mL乙腈飽和正己烷，以3000 r/min離心5 min，棄去正己烷溶液，將底層乙腈水溶液移入棕色樣品瓶中，供液相色譜測定。
 
2.  儀器參數
 
色譜柱：Aglient ZORBAX SB-C18，5 um，250 mm × 4.6 mm； 
 
流速：0.8 mL/min；
 
柱溫：30 ℃；
 
進樣量：30 uL；
 
測定波長：260 nm、275 nm、280 nm；
 
流動相：乙腈與15%甲醇-0.1%甲酸溶液。