液相色譜儀化學鍵合固定相的性能評價

液相色譜儀化學鍵合固定相的重復性、改性完全程度可通過殘余羥基、覆蓋度和覆蓋均勻性表示，測定和評價的方法有微量元素分析法、色譜法和光譜法等。

一、微量元素分析法：

直接測定鍵合相的碳含量。

1、表面鍵合官能團濃度：

        C% =（鍵合相中C的重量/載體的重量）×100%

（1）商品鍵合相：2%～29%

（2）甲基硅烷鍵合相：3%～4%

（3）十八烷基硅烷鍵合相：20%

由于C%隨基質比表面積和鍵合有機基團的分子量的變化而變化，在研究工作中常采用表面鍵合相濃度α表示，即單位表面積所含鍵合相的濃度（umol/m²）。

        α= W/（M×S）

式中：W為1g載體上鍵合有機官能團的質量（ug），M為鍵合有機官能團的摩爾質量（g/mol），S為載體比表面積（m²/g）。

2、表面碳覆蓋率：

即硅膠表面含碳的質量百分數。

        C% =（12×N_C×W/M×10⁶）×100%

式中：12為碳的原子量，N_C為鍵合有機官能團的碳數，W和M含義同上。

3、有機官能團的表面覆蓋度：

即在單位表面積上已鍵合的有機官能團的量（umol）與可反應的硅醇基的量（umol）之比。

二、色譜法：

用非極性鍵合相填料正相洗脫的方法檢查殘余羥基的含量，即用庚烷作流動相。若殘余羥基很少，則象甲醇和丙酮等極性化合物的保留時間與t_M相近，且峰形對稱。若殘余羥基很多，則情況相反。這種評價方法較為客觀。

三、光譜法：

基于Si－OH基在3750cmˉ¹處有特征的紅外吸收譜帶，獲得某些信息。