全自動機械臂固相萃取儀－高效液相色譜法檢測水果中阿維菌素殘留量

　　1 前言

　　阿維菌素類農藥是由鏈霉菌菌株代謝產生的一種大環內酯類抗生素，主要包括阿維菌素、伊維菌素、依普菌素和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽等，是一類具有高選擇性、高殺蟲活性的新型農畜兩用藥。目前廣泛應用于蔬菜、水果中菜青蟲、潛葉蛾和各種抗性蚜蟲等的防治。世界衛生組織將阿維菌素類農藥分級為高毒化合物。采用海能全自動固相萃取儀-高效液相色譜法進行檢測水果中阿維菌素農藥殘留，有效的縮短樣品中目標物的固相凈化所需要的時間，提高了工作效率，也節約了人力；且能精準的控制上樣、淋洗、洗脫等溶劑流速，提高了樣品目標物的回收率。

　　2 儀器與試劑

　　2.1儀器

　　SPE400全自動機械臂固相萃取儀；HN200多功能氮吹儀；高效液相色譜儀；分析天平；組織搗碎機；振蕩器；布氏漏斗；真空泵；其他常規玻璃儀器；濾膜（有機相，0.45μm）。

SPE400全自動機械臂固相萃取儀

　　2.2試劑及耗材

　　實驗用水應符合GB/T6682中一級用水的規格，使用試劑除特殊說明外，均為色譜純。

　　丙酮（色譜純）；甲醇（色譜純）；阿維菌素標準溶液：100μg/mL，甲醇作為溶劑。

　　固相萃取柱：C18，60mg/3ml。

　　3 實驗方法

　　3.1取樣

　　將水果樣品用小刀將其切碎，再用組織搗碎機將其搗碎，裝入潔凈容器內。

　　3.2提取

　　稱取搗碎后試樣約20g于具塞錐形瓶中，加入50mL丙酮，于振蕩器上真當30min，用布氏漏斗抽濾，再用20mL丙酮洗滌具塞錐形瓶過過濾的殘渣，并重復一次。合并提取液，用氮吹儀定容約2mL。

　　3.3固相萃取柱凈化（C18柱）

　　表1 固相凈化條件

　　3.4濃縮

　　用氮吹儀吹至近干，準確加入1.0mL甲醇溶解殘渣，再用0.45μm濾膜過濾，待測。

　　3.5色譜測定條件

　　色譜柱：ODS-C18，粒徑5μm，柱長125mm，內徑4.6mm；

　　流速：1.0mL/min；

　　檢測波長：245nm；

　　柱溫：40℃；

　　進樣體積：20μL。

　　流動相：甲醇：水=（90+10，V/V），梯度如下表：

　　3.6定性分析和定量分析

　　以目標化合物的保留時間定性；以外標一點法定量（即選定峰高相近的標準工作液和樣品溶液中阿維菌素響應值，并且在儀器檢測線性范圍內），并做空白試驗（不加樣品）。

　　4 實驗結果

　　4.1計算公式

樣品中阿維菌素的殘留量：

　　X——試驗中阿維菌素殘留量，mg/kg;

　　h——樣品中阿維菌素峰高，單位為mm;

　　hs——標準工作溶液中阿維菌素峰高，單位為mm;

　　c——標準工作溶液中阿維菌素濃度，單位mg/L；

　　V——樣液最終定容體積，單位mL；

　　m——最終樣液代表的試樣量，單位為g。

　　4.2結論

　　采用SPE400全自動機械臂固相萃取儀可以快速對樣品提取液進行凈化和富集，可做到無人看守、批量處理，省去實驗員繁瑣的加液取液等人工操作，方便快捷。采用SPE400全自動機械臂固相萃取儀對樣品提取液可以精準的控制進樣、加液等流速，有利于固相小柱進行萃取分離，從而實現較好的樣品檢測重復性。

　　參考文獻

　　[1]《GB 23200.19-2016 食品安全國家標準 水果和蔬菜中阿維菌素殘留量的測定》[S].