固相萃取法用于果蔬中有機氯及菊酯類農藥殘留的測定

　　1 前言

　　有機氯農藥是用于防治植物病、蟲害的組成成分中含有有機氯元素的有機化合物。主要分為以苯為原料和以環戊二烯為原料的兩大類。使用最早、應用最廣的殺蟲劑有DDT和六六六，以及氯丹、七氯、艾氏劑等。菊酯類農藥是廣譜性的殺蟲劑，對多種害蟲的防止有特效。有機氯及菊酯類農藥的殘留性可導致對環境及作物的污染，同時也對人們的健康造成影響。本文用SPE400全自動機械臂固相萃取儀對果蔬中有機氯及菊酯類農藥的整個檢測過程中的凈化環節進行了實驗。

　　2 儀器與試劑

　　2.1 儀器

　　SPE400全自動機械臂固相萃取儀、氣相色譜儀、勻漿機、氮吹儀，粉碎機

　　2.2 試劑及耗材

　　乙腈、正己烷、丙酮、氯化鈉

　　丙酮+正己烷（10+90）: 10mL丙酮和90mL正己烷充分混勻后備用

　　弗羅里矽柱，6ml，填充物1000mg

　　有機氯農藥標準品（10ug/mL）、菊酯類農藥標準品（10ug/mL）

　　3 實驗方法

　　3.1 實驗步驟

　　3.1.1 取樣：取果蔬可食部分，將其切碎，充分混勻放入粉粹機中粉碎，制成待測樣。

　　3.1.2 提取：準確稱取三份25.0g試樣于燒杯中，向其中兩份分別準確加入0.25mL有機氯和菊酯類農藥標準品，等待10min后分別向燒杯中加入50mL乙腈，使用勻漿機高速勻漿2min后用濾紙過濾，濾液收集到裝有7g左右氯化鈉的100ml具塞量筒中，收集濾液50mL，蓋上蓋子，劇烈震蕩1min，在室溫下靜置30min，使乙腈相和水相分層。

　　 3.1.3 濃縮：從具塞量筒中吸取10mL乙腈溶液，放入10mL樣品管中，樣品管放在70℃氮吹儀上加熱氮吹至近干，后加入2mL正己烷，蓋上樣品管塞，待凈化。除不加樣品外，空白實驗按上述步驟進行。

（乙腈層提取液）

　　3.1.4 固相小柱凈化

　　將盛有收集液的收集管置于氮吹儀上，50℃條件下氮吹蒸發至小于5mL，后用正己烷定容至5mL，混勻，分別移入兩個2mL自動進樣器樣品瓶中，待測。

　　3.1.5 色譜測定條件

　　色譜柱：1.0m，0.25mm內徑，脫活石英毛細管柱；

　　分析柱采用兩根色譜柱，分別是：

　　A柱：100%聚甲基硅氧烷柱：30m*0.25mm*0.25um或相當者；

　　B柱：50%聚苯基甲基硅氧烷柱：30m*0.25mm*0.25um或相當者；

　　進樣口溫度：200℃

　　檢測器溫度：320℃

　　柱溫：150℃（保持2min）以6℃/min升溫至270℃（保持8min，溴氰菊酯保持23min）；

　　載氣：氮氣，純度≥99.999%，流速1mL/min；

　　輔助氣：氮氣，純度≥99.999%，流速60mL/min

　　進樣方式：分流進樣，分流比為10:1。

　　3.1.6 色譜分析

　　由自動進樣器分別吸取1uL標準混合溶液和凈化后的樣品溶液注入色譜儀中，以雙柱保留時間定性，以A柱獲得的樣品溶液峰面積于標準溶液峰面積比較定量。

　　雙柱測得的樣品溶液中未知組分的保留時間分別與標準溶液在同一色譜柱上的保留時間相比較，如果樣品溶液中某組分的兩組保留時間與標準溶液中的某一農藥的兩組保留時間相差都在±0.05min內的可認定為該農藥。

　　4 結果與討論

　　4.1 正己烷活化步驟因正己烷從固相小柱流出的速度較為緩慢，需要設置合適的等待時間，當正己烷到達吸附層表面時方可上樣，等待過程需加入適量空氣助推縮短時間。

　　4.2 潤洗上樣可有效減少樣品的殘留率，80mL/min的潤洗速度可實現噴淋潤洗，充分將樣品管壁上殘留的樣品溶液洗下后過柱。

　　 4.3 結論

　　用固相萃取法凈化果蔬中有機氯及菊酯類農藥殘留的過程實現自動化，減少人力的消耗，實驗過程中使用的有機溶劑采用密封處理，降低了對人體的傷害且儀器能精準的控制活化、上樣過程中的溶劑流速，使樣品凈化的更為充分。

　　參考文獻

　　[1].NY/T 761-2008 蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定.

　　注意事項

　　[1].實驗中用到的有機試劑均為對人體有害的試劑，建議在通風櫥進行并做好防護措施。

　　[2].提取過程中用到的氯化鈉需經過140℃烘干4h后再使用。

　　[3].標準溶液倒出稀釋時應用稀釋溶劑將標液瓶充分潤洗，減少轉移過程中的損失。

　　[4].移液槍加標液前應將移液槍校準后使用。