(一)液相色譜柱的日常維護
表4 液相色譜中對流動相的要求
(1)溶劑必須“干凈”,在使用前需經過濾板除去顆粒雜質,必要時,在進樣口再加有塊濾 板,以除去可能由泵帶來的顆粒 (2)必須控制吸附色譜中溶劑的含水量,過量水會使吸附劑活性降低,溶質保留值下降 (3)如需在一定PH值下操作,須定期測定流動相的PH值,大氣中的CO2溶解在流動相內將引起PH值的改變,特別是貯液瓶密閉不嚴時這種影響可能更大 (4)軟質或半軟質填料的溶脹率隨溶劑極性的變化而變化,使用新柱時應先用25~30倍柱容積的合適流動相平衡;更換流動相時,如果兩種流動相不互溶,需采用過濾溶劑使前一種流動相逐步溶解除去(例如,2、2、4-三甲基戊烷換成甲醇時,必須用乙酸已酯或其他溶劑過渡,直到標準物保留值達到穩定狀態) (5)為延長不易裝填、價格昂貴的高效柱壽命,可在進樣器和色譜柱之間安裝預柱(預柱應有足夠的雜質容量),對流動相和樣品中的顆粒和雜質進行最后的過濾;在填充和連接預柱時,不應有額外造成譜帶變寬、分離度下降的死體積;預柱與色譜柱的體積之比應保持為1:15至1:25,以減少譜帶變寬 |
表1-5 液相色譜柱的日常維護
(1)每次開機時,流速和柱壓要逐漸增加,突然迅速增加,會使柱床受到沖擊,引起紊亂,產生空隙 (2)在進樣前使色譜系統充分平衡,是否平衡可由基線加以判斷 (3)在進樣前,檢查色譜系統的各個接頭,通常由此能發現是否有漏液現象。如有漏液,空氣會從漏縫進入系統引起基線漂移,影響峰高和峰面積的重復性 (4)不要把柱接頭上得太緊,否則易損壞接頭螺紋,引起滲漏 (5)不要把柱子放在有氣流的地方或直接放到陽光下,氣流和陽光都會使柱子產生溫度梯度造成基線漂移;如果懷疑基線漂移是由溫度梯度引起的,可以設法使柱子恒溫 (6)若儀器用做常規分析,樣品種類有限,但分析次數很多,則不妨為每一類常規分析配置一根專用柱,這樣有助于延長柱壽命 (7)如果懷疑樣品會污染色譜柱,可以用合適的溶劑(幾百毫升)慢慢沖洗柱子過夜,第二天早晨再用流動相重新平衡柱子(約3min) (8)在因裝卸、更換、貯存等而挪動柱子時,動作要輕,不要使其受到碰撞,以免柱床因震動產生空隙或通道 (9)柱要加標簽,新舊分開,不要放在溫度變化很大的地方 (10)柱子不用或貯藏時,應封閉并貯存在惰性溶劑中(見表1-4) |
表1-6 固定相的封存與禁用溶劑
固定相 | 硅膠、氧化鋁、正相鍵合相 | 反相色譜填料 | 離子交換填料 |
封存溶劑 禁用溶劑 | 2、2、4-三甲基戊烷 二氯代烷烴、酸、堿性溶劑 | 甲醇 — | 水 — |
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