液相色譜儀檢測豆制品中大豆異黃酮的方案

液相色譜儀測定大豆產品中大豆異黃酮的含量

大豆異黃酮是大豆生長過程中形成的次生代謝產物。大豆異黃酮是從植物中提取的，具有與雌激素相似的結構，當大豆異黃酮影響激素分泌、代謝生物活性、蛋白質合成和生長因子活性時，大豆異黃酮是天然的癌癥化學預防劑。平時多吃大豆異黃酮有助于抑制前列腺癌細胞的生長。飲食中的大豆異黃酮主要來源于大豆和大豆制品。采用高效液相色譜儀(HPLC)測定了大豆異黃酮的含量。建立了高效液相色譜儀測定大豆異黃酮的方法。

樣品制備：

10 g大豆樣品稱重，用10倍80%乙醇回流1小時，然后超聲提取30分鐘。上清液用定性濾紙過濾，濾液移入100毫升容量瓶中，用0.32um濾膜的溶劑過濾器過濾。從10ml和離心管中準確提取液樣，用水浴氮氣風機在50℃濃縮結晶，溶于5ml乙腈-0.2%乙酸溶液中。過濾0.32um膜，移入樣品瓶進行高效液相色譜儀分析。

檢測儀器：

超高液相色譜儀(紫外檢測器，四元數泵，手動采樣器)，氮氣

試劑：甲醇、乙腈（色譜純度）；水：蒸水；以乙醇為分析純度的樣品制備；大豆異黃酮標準品：大豆苷、大豆苷、染料木素、大豆苷、大豆苷、染料木素。

色譜條件：

色譜柱為C18柱(150mm、6mm、5μm),流動相為乙腈溶液和醋酸溶液,流速為0.15mL·min,柱溫為200℃,進樣體積為5/L·L~(-1)。

采用溶劑過濾器制備樣品，保證了樣品的純度，有效地防止了雜質對檢測結果的影響。采用水浴式氮氣風機將空氣與樣品溶劑分離，高溫加熱結晶，更適合于標準樣品溶液的配制。采用液相色譜儀測定大豆制品中異黃酮的含量，重現性好，精密度高，回收率高。