液相色譜儀流動相的預處理

液相色譜儀流動相的預處理包括流動相過濾和脫氣等。

一、流動相過濾：

所有溶劑使用前都必須經0.45μm或0.22μm濾膜過濾，以除去雜質微粒。色譜純試劑也不例外，除非在標簽上標明已過濾。

用濾膜過濾時，要注意分清有機相（脂溶性）濾膜和水相（水溶性）濾膜。

有機相濾膜一般用于過濾有機溶劑，過濾水溶液時流速低或過濾不動。

水相濾膜只能用于過濾水溶液，嚴禁用于有機溶劑。否則濾膜會被溶解，溶有濾膜的溶劑不得用于HPLC。

對于混合流動相，可在混合前分別過濾。如需混合后過濾，有機相濾膜。現已有混合型濾膜。

二、流動相脫氣：

1、流動相脫氣的原因：

HPLC所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響泵工作、柱分離效率、檢測器靈敏度和基線穩定性，甚至無法檢測。

（1）流動相中的溶解氧可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。

（2）溶解氧會引起溶劑pH變化，給分析結果帶來誤差。

（3）溶解氧能與某些溶劑（如甲醇和四氫呋喃）形成有紫外吸收的絡合物，此絡合物會提高背景吸收（特別是在260nm以下），導致檢測靈敏度輕微降低，更重要的是在梯度洗脫時會造成基線漂移或形成鬼峰。除去溶解氧將大大提高UVD的性能。

（4）在熒光檢測中，溶解氧在一定條件下會引起淬滅現象，特別是對芳香烴、脂肪醛和酮等。在某些情況下，熒光響應可降低達95%。除去溶解氧將改善在一些熒光檢測中的靈敏度。

（5）在電化學檢測中（特別是還原電化學法），溶解氧的影響更大。

2、常用脫氣方法：

有吹氦脫氣法、加熱回留法、超聲波脫氣法、抽真空脫氣法和在線真空脫氣法等。