液相色譜儀紫外可見吸收檢測器(UVD)屬于選擇性檢測器,是液相色譜中應用最廣泛的檢測器。液相色譜中約75%的檢測器是UVD(其中50%是多波長,25%是PDAD)。
一、結構與原理:
液相色譜流通池內樣品的濃度與吸光度的關系遵循Beer定律:
A = ㏒(I0/I)=εbc
式中:A為吸光度,I0為入射光強度,I為透射光強度,ε為樣品的摩爾吸光度,b為流通池的光程長度,c為樣品濃度。
UVD常用氘燈作光源,裝有一個光柵型單色器,有兩個流通池,一個是參比池,另一個是測量池。
氘燈發射出紫外-可見區范圍的連續波長的光,波長選擇范圍為190~800nm。光線照射到全息凹面光柵上,衍射的單色光照射到半透射反光鏡上被分成兩束,一束經測量池后照射到測量光電池上,另一束經參比池后照射到參比光電池上。若兩個流通池都通過純的均勻溶劑,則它們在紫外光下幾乎無吸收,兩個光電池上接收到的輻射強度相等,即無信號輸出。當組分進入測量池時,吸收一定的紫外光,使兩個光電池接收到的輻射強度不等,即有信號輸出,輸出信號大小與組分濃度成正比。
二、特點:
1、波長可選。
2、靈敏度高。
3、噪聲低,線性范圍寬。
4、對流動相的溫度和流速變化不敏感。
5、適用于梯度洗脫,可用于制備。
6、能與多種檢測器串聯使用。
三、不足:
1、對紫外吸收差的化合物(如不含不飽和鍵的烴類等)靈敏度很低。
2、流動相的選擇受到一定限制。
(1)紫外吸收大的溶劑不能做流動相。
每種溶劑都有截止波長,當小于該截止波長的紫外光通過溶劑時,溶劑的透光率降至10%以下,因此,流動相的截止波長不能大于UVD的工作波長。用截止波長以上至少5~10nm作為工作波長。
(2)緩沖鹽、離子對試劑和胺改性劑也會有影響。
四、應用:
對大部分有機物有響應。
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