使用Q Exactive Focus液相色譜質譜聯用系統快速靈敏測定肉、血漿和牛奶中的多類獸藥殘留
Olaf Scheibner, Maciej Bromirski, Thermo Fisher Scientific, Bremen, Germany
關鍵詞
Q Exactive Focus，Orbitrap，獸藥，HRAM定量，HRAM篩查，vDIA，未知物篩查，回顧性數據分析
目的
本實驗利用可變數據非依賴采集（vDIA），建立了一種獸藥分析的新方法。該法具備高靈敏度和高選擇性，能夠獲得被測樣品全面而高質量的數據，并可將定量分析與非目標物和未知物篩查相結合。
引言
考慮到樣品預處理和質譜分析的復雜性，動物源食品中的獸藥殘留分析通常是一個費時的過程。利用傳統方法對動物源食品（包括肉、奶和血漿）中多類獸藥殘留進行定量分析，常常需要多次進樣以獲得各類成分的最佳分析條件，包括針對不同種類化合物而開發的不同色譜和質譜方法。并且所獲數據僅僅包含目標化合物的信息，而不適用于其它化合物的回顧性分析。
本實驗使用超快速液相色譜和Thermo ScientificTM Q Exactive FocusTM臺式 OrbitrapTM質譜聯用系統建立了一種新方法，其包含快速色譜方法和可變數據非依賴采集（vDIA）質譜方法。該法具有總分析時間短、選擇性高和靈敏度高等優點，并且其采集的數據能夠用于其它目標物和非目標物篩查。本實驗利用vDIA方法制作標準曲線，并對樣品中已知和未知目標化合物進行分析。vDIA允許設置多個MS/MS隔離窗口，窗口寬度可從50Da到800Da。通常較小的窗口寬度用于低質量區域以擴展動態范圍和提高靈敏度，較大的窗口寬度用于更高質量區域以改善工作周期。該法的典型方法設置如本文所示，用5組MS/MS隔離窗口覆蓋全掃描的整個質量數范圍，同時保持MS/MS分析速度與快速色譜分離相匹配。
圖1 Q Exactive Focus臺式Orbitrap質譜儀
如表1所示，分析成分為44個不同種類的獸藥殘留，分析樣品包括肌肉、腎臟、牛奶和血漿提取物，所有樣品均采用相同的標準化色譜和質譜方法進行分析。為了進行絕對定量分析，44個濃度已知的獸殘標準品被配制成8個不同濃度的標準品溶液（從100pg/mL （ppt）到500ng/mL （ppb））。采用高分辨、高質量精度的（HRAM）LC-MS/MS方法，分析基質加標樣品（肌肉和腎臟中加入抗生素標樣、牛奶中加入阿維菌素類標樣、血漿中加入硝酸咪唑類標樣）以評價方法。
表1 目標化合物及其定量限（LOQ）
