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  • 發布時間:2009-01-01 00:26 原文鏈接: 溶膠凝膠膜包埋的胰蛋白酶用于高通量蛋白質肽譜分析

    摘 要 采用溶膠凝膠包埋法在96孔板中固定胰蛋白酶,制備高通量的酶解反應器。考察了四乙氧基硅烷(TEOS)與甲基三甲氧基硅烷(MTMS)的不同比例對凝膠膜的成膠速度、機械強度、透明度、固定酶的活性及穩定性的影響。以牛血清白蛋白(BSA)為目標蛋白,比較了溶膠凝膠固定化酶與溶液態酶的穩定性和催化活性,用HPLC對BSA的酶解產物進行了肽譜分析,比較了二者的酶解效率。結果表明, TEOS與MTMS比例為1∶1時,凝膠膜有很好的成膠速度、機械強度、透明度;包埋態酶有很高的活性和穩定性。HPLC對肽段的分析結果表明,固定化酶的酶解效率優于溶液態酶。
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