“熊貓血”不再怕,使用CRISPR基因編輯增強紅細胞輸血相容性

　　近日，英國布里斯托大學（University of Bristol）的科研人員在 EMBO Molecular Medicine 雜志發表題為：Enhancement of red blood cell transfusion compatibility using CRISPR-mediated erythroblast gene editing的論文，通過CRISPR基因編輯紅細胞，增強其輸血相容性。為長期輸血的患者的同種免疫以及“熊貓血”輸血時難以匹配血型的難題帶來了新的解決方法。

　　定期輸血是紅細胞疾病(如地中海貧血或鐮狀細胞病)的治療基礎，由于反復輸血，同種免疫常常由于在小血型抗原水平上的不相容性而發生。

　　個體存在的非病例但罕見的天然血型表型，雖然這些“熊貓血”很罕見，但在整個人類群體并不算少，他們需要輸血時，往往難以匹配到血液。

　　在該研究中，作者使用CRISPR介導的基因組編輯永生化人類成體紅細胞系（BEL-A）以產生有核紅細胞系，其可以分化成成熟紅細胞。

　　在BEL-A細胞系中表達5個sgRNA，敲除5個紅細胞中與血型相關的基因，這5個基因編碼了最常見的輸血不相容性抗原。這5個sgRNA序列信息是之前研究中已被驗證過的。

敲除這5個基因后，暴露在圖中的任何抗體中，均不發生血液凝集

敲除的5個基因，及其sgRNA序列

　　注1：永生化人類成體紅細胞系，由該團隊從成體干細胞培育而來，可以無限增殖，在分化成成熟紅細胞前可以大規模生產以滿足臨床需求。該成果于2017年3月發表在 Nature Communications 雜志。

　　注2：成熟的紅細胞沒有細胞核，是由有核紅細胞分化而來。

　　特別值得指出的是，該團隊成員使用了CRISPR/Cas9技術實現了5個基因的同時敲除。

　　使用的載體是：lentiCRISPRv2，該載體由張鋒實驗室2014年發布。圖譜如下：

lentiCRISPRv2載體