科華酶標儀KHBST360酶標儀SOP文件

6.2 計算方式

儀器的計算方式有九種，當選擇了計算方式中的某一項后，有相應的參數需要選擇和設置。

6.2.1 吸光度法：結果以吸光度形式輸出，無需參數設置。

6.2.2 因子計算法：測出的吸光度值和用戶給出的因子相乘得出濃度，濃度單位由因子單位確定。濃度根據以下公式計算：

濃度 = 因子 × 吸光度

參數設置：因子。

6.2.3 標準濃度法：用戶輸入標準品濃度，酶標儀通過這些標準品，用所選公式擬合成曲線，通過標準曲線，可將測量得出的吸光度換算成濃度。

參數設置：擬合公式及相應系數和標準品的序號、位置、濃度。

6.2.4 標準曲線法：用戶輸入所選擬合曲線的A、B、C、D值來確定標準曲線，酶標儀用該曲線方程來計算濃度。

參數設置：擬合曲線及相應擬合曲線系數。

6.2.5 單限檢測法：儀器測出的吸光度與用戶定義的或按公式計算出的一個極限值比較，如果低于極限值，會出現負號“－”。相反，會出現正號“﹢”。如果極限值為負，出現結果相反。

參數設置：極限值、系數A、B、C及陰陽性。

6.2.6 雙限檢測法：儀器測出的吸光度與用戶定義的兩個限值比較。如結果低于兩個限值，會出現負號“－”；如結果在兩個限值之間，出現“0”；如結果高于兩個限值，會出現正號“﹢”。

參數設置：低極限值、高極限值。注：低限值必須小于高限值。

6.2.7 等級檢測法：用戶定義的數值被分成10個部分，10個部分編號為0~9。測出的吸光度值根據它所在的部分以0~9中的編號反映出來。

參數設置：等級范圍值。

6.2.8 列減法：第二列結果減去第一列結果，第四列結果減去第三列結果，或反之。

參數設置：列減方法。

6.2.9 兩點法：用戶輸入標準品濃度，儀器通過標準品計算出點到點的標準曲線。通過這一曲線，將測得的吸光度值轉換成濃度。

參數設置：標準品的序號、位置及濃度，設置方法與標準濃度法相同，只是擬合時點到點之間為一條直線。

6.3 功能設置

6.3.1 樣品盤運動方式

用戶可按A~D中任一字母鍵或按【↑】、【↓】鍵選擇樣品盤運動方式并按【確定】鍵確認。

6.3.2 結果輸出處理

屏幕中，A、B為對應項，C、D為對應項，E、F為對應項，用戶只能選擇對應項中的某一項。

6.3.3 每盤標準處理

用戶可按A、B選擇或按【↑】、【↓】鍵選擇每盤標準處理方式，并按【確定】鍵確認。注：只對計算方式3、9有效。

6.3.4 存儲當前內容

用戶可按A、B選擇存儲程序還是結果，按1~50選擇存儲的號碼。儀器共可存儲50個程序設置和50次測量結果。

6.3.5 調用已存內容

可按A、B及1~50調出上面一步（存儲當前內容）中存儲的內容。

6.3.6 打印已存內容

6.3.7 濾光片設置

輸入要更改的位置和波長。建議：用戶不可隨意修改該項設置。

6.3.8 時鐘設置

按A、B、C、D、E鍵選擇進行相應設置。

6.3.9 恢復默認值

7 校正程序

7.1 濾光片波長精度檢查

將不同波長的濾光片從酶標儀上卸下，用UV-2201型紫外-可見分光光度計（波長精度±0.3nm）于可見光區對每個濾光片進行掃描，其檢測值與標定值之差為濾光片波長精度。一般酶標儀無585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片。450nm 濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長為630nm）。

7.2 通道差與孔間差檢測

通道差檢測是取一只酶標板小孔杯（杯底須光滑，透明，無污染以酶標板架作載體， 將其（內含200ul甲基橙溶液吸光度調至0.500A左右）置于8個通道的相應位置，蒸溜水調零，于490nm處連續測三次,觀察其不同通道的檢測器測量結果的一致性，可用極差值來表示。孔間差的測量是選擇同一廠家，同一批號

酶標2板條（8條共96孔）分別加入200ul甲基橙溶液（吸光度調至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸溜水調零,于490nm處檢測，其誤差大小用±1.96s衡量。

7.3 零點飄移（穩定性觀察）

取8只小孔杯分別置于8個通道的相應位置，均加入200ul蒸餾水并調零，于490nm處每隔30分鐘測一次，觀察各個通道4小時內吸光度的變化。

7.4 精密度評價

每個通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同濃度的甲基橙溶解，蒸餾水調零，于490nm作雙份平行測定，每日測二次（上下午各一次），連續測定20天。分別計算其批內精密度，日內批精密度,日間精密度和總精密度及相應的CV值。

7.5 線性測定

用電子天平精確稱取甲基橙配制5個系列的溶液，于490nm平行測8次，取其均值。計算其回歸方程，相關系數及標準估計誤差s，并用±1.96s表示樣品測量的誤差范圍.雙波長測定評價：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶（測定波長為490nm，校正波長為585nm），先后于8個通道檢測，每個通道測3次，比較各組之間是否具有統計學差異，以考察雙波長消除干擾組分的效果。

8 自校規范

8.1 測定原理：根據樣品OD值計算樣品中抗原或抗體的濃度。

8.2 校準條件：儀器正常工作需要以下環境：溫度18~25℃，濕度45~85%RH，電壓220V。

8.3 品：選擇衛生部質控血清或公認質量好的質控品嚴格按照操作說明進行。

8.4 校準方法：每日測定HBsAg質控品，月底計算CV值。

8.5 校準步驟

8.5.1 按照操作說明進行校準測定。

8.5.2 RCV值的測定，在日常工作條件下規范操作，每一個質控項目連續測定20天。

8.5.3 對檢測結果進行統計學處理，計算出靶值、標準差(SD)、變異系數(CV)。

8.5.4 用RCV的測定結果建立室內質控，判斷標準以《管理與技術規程》為準。

9 維護保養程序

9.1 保養

9.1.1 為保證儀器持續的穩定性和準確性，應干擾光學系統的任何部件。光路的調校錯誤會影響測量結果。

9.1.2 保持光學系統的清潔，以確保正常功能和結果的準確，應避免任何液體流入儀器內部，并防塵、防止其它外源性物質，不要用手指摸透鏡表面、濾光鏡、光電檢測器。

9.2 儀器常規清潔

9.2.1 關掉儀器，并拔掉電源插頭。

9.2.2 使用一次性手套，用一次性擦布沾水或溫和去污劑，清潔儀器外部、導軌和板架。

9.3 清潔光學系統：詳見儀器使用說明書。

9.4 消毒方法：在使用危險性的傳染性物質后，用以下方法消毒儀器

9.4.1 關掉儀器，并拉掉電源插頭。

9.4.2 使用一次性手套，用一次性擦布沾70%乙醇，清潔儀器外部、軌道和板架。

9.4.3 儀器內部消毒，詳見儀器使用說明書。

10 配套中文電腦操作

10.1 打開電腦主機及顯示器。

10.2 雙擊進入酶管理系統。

10.3 在“病人資料”菜單確認今日值班。

10.4 在“病人資料”菜單中輸入當日化驗單的病人資料。

10.5 在“檢驗報告單”菜單中檢查，修改及打印報告單。

10.6 在“酶免疫管理系統”單擊進入“中文轉換”系統。

10.7 給當日的標本排列及編號。

10.8 根據項目接收酶標儀傳送的數據。

10.9 退出“中文轉換”及“酶免疫管理”系統。

10.10 單擊“開始”選擇“關閉系統”等待出現可以安全關機時，關掉主機及顯示器。

11 職責

11.1 實驗室工作人員應該嚴格按照本SOP進行操作。

11.2 本SOP的改動，可由任一使用本儀器的工作人員提出，并報經本實驗室負責人、科主任簽字批準方可通過。